禾本科牧草异型发酵乳酸菌的分离鉴定及对青贮发酵品质和有氧稳定性的影响

摘要

本研究的主要目的，选择禾本科牧草——无芒雀麦为主要研究对象，筛选其上所附着的优良异型发酵乳酸菌；经种属鉴定确定其分类；并且将此异型发酵乳酸菌作为青贮添加剂加入无芒雀麦青贮中，研究其对青贮发酵品质及有氧稳定性的影响。为青贮发酵进程和有氧稳定性研究和农牧区禾本科牧草高品质利用提供理论基础。
　　 本研究结果表明，无芒雀麦鲜牧草表面附着的微生物主要以一般细菌，酵母菌，霉菌为主，它们的含量均大于106cfu/gFM（每克鲜牧草含菌落单位），无芒雀麦鲜牧草表面附着的乳酸菌的数量较少，最高含量低于5×104cfu/gFM，由此可知，这不能满足乳酸发酵为主的青贮中乳酸菌的最低数量（105cfu/gFM）需求。因此要想获得优质的禾本科牧草青贮需要添加一定的乳酸菌来主导发酵。
　　 从野生和人工种植的禾本科牧草上共分离得到8株异型发酵乳酸菌，通过形态学，生理生化指标及碳水化合物发酵试验进行筛选、鉴定，最终获得2株过氧化氢酶阴性，产酸迅速，无运动性可在广泛的温度范围内生长，并且可以迅速有效的利用各种碳水化合物的异型发酵乳酸菌——布氏乳杆菌。其中一株（qq4011）生长迅速，在接种后14小时进入对数生长期，最高活菌数接近109cfu/ml培养液。这些特性对促进作物的发酵有良好的效果。
　　 应用分离得到的布氏乳杆菌（qq4011）与实验室保藏的内蒙自然科学基金重点项目（200711020403）分离得到的蒙氏肠球菌（S1518）和植物乳杆菌（S2409）做为添加剂，进行无芒雀麦牧草青贮发酵特性和有氧稳定性的研究。试验分4个处理：对照组（con），喷洒等量的水；异型乳酸菌处理组(he)，喷洒qq4011；同型乳酸菌处理组(ho)，喷洒S1518和S2409；同型乳酸菌+异型乳酸菌混合处理组（he+ho），喷洒qq4011、S1518和S2409。
　　 在厌氧发酵阶段，添加同型发酵乳酸菌S1518和S2409可以促进乳酸发酵，提高青贮中乳酸含量，降低乙酸、氨态氮含量；添加异型发酵乳酸菌qq4011降低了青贮中乳酸、氨态氮含量，提高了乙酸含量，两种不同类型的乳酸菌添加剂qq4011、S1518和S2409混合添加同时提高了青贮中乳酸、乙酸含量，降低了氨态氮含量。添加不同类型的乳酸菌都可以抑制霉菌、丁酸菌的生长，减少CP,WSC损失，但是对NDF、ADF、Ash含量没有明显影响。在有氧暴露试验期间，同型发酵乳酸菌处理组pH值上升很快，乳酸、乙酸、WSC含量迅速下降，酵母菌和霉菌的数量上升，青贮饲料有氧稳定性与对照组相比差异不显著（p>0.05）。异型发酵乳酸菌处理组pH值在整个试验期内变化非常缓慢，乳酸、乙酸、WSC含量损失显著低于其它3个处理组（p<0.05），酵母菌和霉菌的数量在有氧暴露试验期间没有出现大量增殖的情况，添加异型发酵乳酸菌显著提高了青贮饲料在有氧暴露期间的稳定性（p<0.05）。同型发酵乳酸菌与异型发酵乳酸菌混合添加组乳酸、乙酸含量显著高于对照组，pH值开始急剧上升的时间、WSC含量急剧下降的时间比对照组晚，酵母菌和霉菌的数量在有氧暴露试验期间没有出现大量增殖的情况，两种不同类型乳酸菌混合添加显著提高了青贮在有氧暴露试验期间的稳定性（p<0.05）。

目录

1 引言

2 试验一 禾本科牧草上附着优良异型发酵乳酸菌的筛选

3 试验二 两株优良异型发酵乳酸菌基本生长特性检测

4 试验三 不同乳酸菌添加剂对无芒雀麦发酵品质的影响

5 试验四 不同乳酸菌添加剂对无芒雀麦青贮有氧稳定性的影响

7 本研究的创新点

8 有待进一步研究的问题

6 论文总体结论

致谢

参考文献

附录

作者简介

论文说明:缩略语表

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