寇氏隐甲藻(Crypthecodinium cohnii)培养生产DHA的研究

摘要

DHA（二十二碳六烯酸）在婴幼儿大脑发育和视力发育中具有非常重要的生理作用，并且具有防治心血管疾病，提高人体免疫力和消炎、抗癌等功能。寇氏隐甲藻（Crypthecodinium cohnii）细胞油脂富含DHA，而其他多不饱和脂肪酸（PUFAs）含量较少，可以在添加了有机底物的培养基中异养生长，是人体补充DHA的良好来源。
　　研究了温度和培养基的初始pH值对寇氏隐甲藻生长和油脂积累的影响。高温有利于细胞的生长，30℃发酵培养的生物量最大，达到25.25g/L；低温有利于油脂的积累，15℃条件下发酵，藻体内油脂含量达到40％。将整个发酵过程分为两个阶段，即28℃条件下培养5天，然后在22℃条件下再培养2天，油脂总产量达到8.28g/L，这种温度变化的两阶段发酵过程较恒温发酵油脂产量高。培养基的初始 pH值在6.5~7.0时，生长速率最快，但油脂的积累对培养基的初始pH值的依赖性不是很强。
　　对培养基中葡萄糖、味精和酵母膏进行优化，得到葡萄糖的最佳浓度为68g/L，味精的最佳浓度为30g/L，酵母膏的最佳浓度为6.5g/L。在最佳配方下，DHA的最终产量达到2.41g/L。
　　测定了寇氏隐甲藻的生长代谢曲线。发酵7天后收集藻体较为合理。运用超声波法、生物酶法，反复冻溶法等方法，对寇氏隐甲藻进行了破壁研究。研究表明，这些方法都对寇氏隐甲藻都具有一定的破壁作用，尤以碱性蛋白酶效果为佳，破壁后油脂的提取率也有了不同程度的提高。把酶法破壁和超声波法破壁结合起来，在酶解5h后，再超声波1h，破壁率可高达91.7%，油脂提取率提高了21.7%，破壁效果更为理想。

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1 概述

1.1 DHA的结构和功能

1.2 DHA的来源

1.3 寇氏隐甲藻生产DHA的研究进展

1.4 本课题研究的重要意义和研究内容

2 材料与方法

2.1 试验材料和仪器设备

2.2 试验方法

2.3 分析方法

3 结果与分析

3.1 形态特征

3.2 温度对寇氏隐甲藻生长和油脂积累的影响

3.3 培养基的初始pH值

3.4 培养基的优化

3.5 生长代谢曲线的测定

3.6 不同破壁方法对寇氏隐甲藻提油效果的影响

4 结论

致谢

参考文献

作 者 简 介