内蒙古绒山羊不同月份皮肤蛋白质组分析

摘要

绒山羊以其独特的绒毛产品成为重要的经济动物，在动物生产中享有重要的地位。当绒毛快速生长时，毛囊细胞分裂的速度很快，合成蛋白质效率非常高，绒山羊的毛囊一年中要合成大量的绒毛结构蛋白，且毛囊呈现明显的年周期性变化。
　　本研究从蛋白质组的水平，对内蒙古绒山羊不同时期皮肤蛋白质差异表达进行了探讨。为获得与毛囊周期相关或影响到毛囊发育的蛋白质或获得基因的组成、结构与功能提供了研究的思路。
　　研究建立了内蒙古绒山羊1～12月份皮肤蛋白质单向电泳表达谱，经过单向电泳对皮肤蛋白质的分离，初步分析了皮肤蛋白质的表达情况。内蒙古绒山羊皮肤蛋白SDS-PAGE电泳得到19条主要蛋白条带，分子量范围在189.38～14.91 KD之间。其中占总蛋白百分含量最高的为条带1、7、8、9、10、11，分子量分别为189.38 KD、55.93 KD、52.21 KD、48.42 KD、45.89 KD、38.38 KD。不同时期的皮肤蛋白质样品中，相同条带占总蛋白的百分比几乎都保持在一个相近的范围内，并没有发现的某一时期的蛋白质样品在某一分子量明显的高表达或低表达。
　　研究利用液氮研磨法成功分离提取了内蒙古绒山羊皮肤蛋白质，系统优化了内蒙古绒山羊皮肤蛋白质组双向凝胶电泳技术（2-DE），使之有效地用于内蒙古绒山羊皮肤双向凝胶电泳图谱的构建。利用上述方法和技术，研究首先建立了内蒙古绒山羊皮肤在pI3-10范围内不同时期的全蛋白质表达图谱。研究利用生物信息学技术对其中差异表达蛋白质进行了比较分析。
　　经过对内蒙古绒山羊1～12月份皮肤蛋白质2-DE图谱分析，发现在4月份和8月份出现了相对较多的蛋白斑点。不同时期皮肤蛋白图谱具有较高的相似性，而相邻月份间的匹配率更高。特异蛋白点分析发现有2个蛋白点只在3月份图谱中出现，2个蛋白点只发现在7月份图谱中，1个蛋白点只发现在8月份图谱中。内蒙古绒山羊不同月份皮肤差异蛋白质组研究结果显示，在选取的21个1～12月份共表达的高丰度蛋白点中，并没有发现它们保持某种一致的变化规律，而是不同的蛋白点在不同时期的皮肤中显示出表达规律的不同。
　　利用单向电泳技术和双向电泳技术，对不同时期内蒙古绒山羊皮肤差异蛋白质组进行了比较研究，不仅有利于对内蒙古绒山羊皮肤的蛋白质表达及分布情况做全面了解，还可以提供重要的相关数据及信息从分子水平上揭示其毛囊周期变化机制，从而为进一步地开发和利用内蒙古绒山羊的经济价值奠定基础。

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缩 略 语 表

1 引言

1.1 蛋白质组学研究概况

1.2 蛋白质组学在皮肤研究中的应用

1.3 内蒙古绒山羊概述

1.4 立题意义与研究内容

2 实验材料与方法

2.1 实验材料

2.2 实验方法

3 结果与分析

3.1 内蒙古绒山羊不同月份皮肤中蛋白质含量的动态变化

3.2 内蒙古绒山羊不同月份皮肤蛋白质单向电泳结果及分析

3.3 内蒙古绒山羊不同月份皮肤蛋白质双向电泳结果及分析

4 结论与讨论

4.1 结论

4.2 讨论

5 展望

致谢

参考文献

附录

作 者 简 介