雌激素对奶牛输卵管平滑肌前列腺素E2和F2α合成及其受体表达调控的影响

摘要

前列腺素（Prostaglandins,PGs）是哺乳动物体内广泛存在的一种局部激素，其合成与受体表达影响到哺乳动物生殖生理的各个环节，包括：排卵、着床、分娩、黄体溶解等。奶牛输卵管中影响生殖的主要是前列腺素E2（Prostaglandins E2，PGE2）和前列腺素F2α（Prostaglandins F2α，PGF2α），其对输卵管内容物的输送、精子和卵子的结合以及早期胚胎发育均有着重要的生理作用。本研究以奶牛输卵管平滑肌为研究对象，探讨了雌激素（17β-estrogen,E2），对奶牛输卵管平滑肌PGE2和PGF2α合成及其受体表达的调控作用，具体研究内容如下：
　　1、雌激素对PGE2和PGF2α合成酶表达的调控
　　体外培养奶牛输卵管平滑肌组织，采用实时荧光定量PCR法检测雌激素对奶牛输卵管平滑肌PGE2和PGF2α合成酶mRNA表达的调控作用，采用Western Blot法检测雌激素对奶牛输卵管平滑肌PGE2和PGF2α合成酶蛋白表达的调控作用，结果显示，COX-1、COX-2、mPGES-1、PGFS mRNA表达水平在雌激素诱导下均以浓度和时间依赖的方式增高，其蛋白表达变化在时效上与mRNA表达变化相一致。mPGES-2、cPGES mRNA和蛋白表达水平在时间和浓度上都不受E2调控。加入雌激素阻断剂后，COX-1、COX-2、mPGES-1、PGFS mRNA表达水平与E2作用后相比均下降，且与空白对照组表达水平一致。
　　2、雌激素对PGE2和PGF2α受体表达的调控
　　体外培养奶牛输卵管平滑肌组织，采用实时荧光定量PCR法检测奶牛输卵管平滑肌存在的PGE2和PGF2α受体种类，以及雌激素对奶牛输卵管平滑肌PGE2和PGF2α受体mRNA表达的调控作用，采用Western Blot法检测雌激素对奶牛输卵管平滑肌PGE2和PGF2α蛋受体白表达的调控作用，结果显示，EP2、EP4和FP受体 mRNA和蛋白表达水平在雌激素诱导下均以浓度和时间依赖的方式增高，且mRNA和蛋白表达在浓度和时间增高的趋势相一致。加入氟维斯群和他莫昔芬（选择性雌激素受体拮抗剂）后，EP2、EP4和FP受体 mRNA表达水平与E2作用后相比均下降，且与空白对照组相比表达在同一水平。
　　3、雌激素对体外培养奶牛输卵管平滑肌收缩作用的调控
　　体外培养奶牛输卵管平滑肌组织，采用多道生理信息采集系统测定其收缩性及舒张性的变化。结果显示，雌激素作用后，E2能够使奶牛输卵管平滑肌更敏感于PGE2和PGF2α引起的收缩反应。
　　结论：
　　1、奶牛输卵管平滑肌COX-1，mPGES-1、PGFS的mRNA和蛋白表达受雌激素调控，且存在时间和浓度依赖性。
　　2、奶牛输卵管平滑肌上存在EP2、EP4和FP受体，且其mRNA和蛋白的表达受雌激素调控，且存在时间和浓度依赖性。
　　3、雌激素能够使奶牛输卵管平滑肌更敏感于PGE2引起的舒张反应和PGF2α引起的收缩反应。

目录

缩 略 语 表

1 引言

1.1 前列腺素类化合物及其受体

1.2 前列腺素类及其受体与动物生殖

1.3 雌激素的作用

1.4 研究目的与意义

2 实验一 雌激素对体外培养的奶牛输卵管平滑肌PGE2，PGF2α合成调控的影响

2.1材料与方法

2.3 结果

2.4 讨论

2.5小结

3 实验二 雌激素对体外培养的奶牛输卵管平滑肌PGE2，PGF2α受体表达调控的影响；

3.1材料与方法

3.2 结果

3.3 讨论

3.4 小结

4 实验三 雌激素对奶牛输卵管平滑肌收缩的影响作用研究

4.1材料与方法

4.2 结果

4.3讨论

4.4 小结

5全文讨论

6 结论

7 创新点：

致谢

参考文献

作 者 简 介