文冠木中10种有效成分的定量和活性测定

摘要

研究目的:测定文冠木中10种生物活性成分的含量，并评估其抗氧化，DNA断裂保护和α-葡萄糖苷酶抑制活性。
　　方法:通过建立和使用超高效液相色谱-四极质谱法（UHPLC-MS）对文冠木中10种化学成分同时定量。通过测量清除DPPH自由基和对DNA断裂的保护作用对化合物的抗氧化活性进行了评价。通过测定对嗜热脂肪芽孢杆菌α-葡萄糖苷酶和小鼠小肠二糖酶的抑制作用对化合物的α-葡萄糖苷酶抑制活性进行了研究。
　　结果:我们发现，文冠木富含酚类化合物，其中儿茶素、表儿茶素、杨梅素和二氢杨梅素的含量分别是0.12-0.19，1.94-2.16，0.77-0.91和6.76-7.89 mg·g-1。这4个成分具有很强的清除DPPH自由基（EC50分别为6.5，4.2，3.8和5.7μg·mL-1）和显著的保护过氧自由基诱导的DNA链断裂（在化合物浓度为10μM时，DNA保留分别为92.10％，94.66％，75.44％和89.95％）。二聚体黄烷-3-醇，epigallocatechin-(4β→8，2β→ O-7)-epicatechin有效抑制α-葡糖苷酶，其IC50值低至1.2μg·mL-1。
　　结论:所建立的UHPLC-MS方法可以作为文冠木的一种质量控制工具。文冠木中高含量的抗氧化剂和α-葡萄糖苷酶抑制成分支持其作为治疗以Ⅱ型糖尿病为代表症状的代谢综合征的治疗补充剂。

目录

声明

摘要

缩略词

一、引言

1．1 文冠木的研究现状及进展

1．2．文冠木的化学成分研究

1．2．1 黄酮类

1．2．2 萜类

1．2．3 香豆素和其他类

1．3 文冠木的药理作用

1．3．1 抗炎作用

1．3．2 抑制艾滋病毒蛋白酶(HIV-1 PR)作用

1．3．3 改善学习记忆功能

1．3．4 抗凝血作用

1．3．5 镇痛作用

1．4 文冠木的临床应用

1．4．1 治疗风湿性关节炎

1．4．2 对糖尿病并发的末梢神经血管病变治疗

1．4．3 治疗痤疮

1．4．4 治疗高血压

1．4．5 治疗脂溢性皮炎

1．5 抗氧化指标检测

1．5．1 清除自由基的测定方法

1．5．2 自由基对DNA的氧化性损伤

1．5．3 抗DNA氧化损伤作用的检测

1．6 葡萄糖苷酶抑制剂活性研究

1．7 HPLC-MS分析技术

二、材料与方法

2．1 药材

2．2 主要药品与试剂

2．3 实验仪器设备

2．4 定量对照品和样品的制备

2．4．1 对照品溶液制备

2．4．2 样品溶液制备

2．4．3 质谱条件

2．4．4 高效液相色谱条件

2．4．5 绘制标准曲线

2．4．6 线性关系、最低定量限和最低检测限考察

2．4．7 精密度试验、重复性、稳定性试验

2．5 文冠木中10种有效成分活性测定

2．5．1 抗氧化活性测定

2．5．2 α-葡萄糖苷酶抑制活性

2．5．3 麦芽糖酶抑制活性实验

2．5．4 抑制α-葡萄糖苷酶活性机理

三、结果与分析

3．1 定量方法的建立及样品的检测

3．2 文冠木提取物和表儿茶素人工消化液处理后的含量变化

3．3 文冠木中10种有效成分的活性

3．4 抑制α-葡萄糖苷酶活性机理

结论

参考文献

攻读硕士学位期间发表的论文

致谢