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摘要
英文缩略词
一.前言
二.材料与方法
2.1 材料
2.1.1 仪器设备
2.1.2 试剂溶液
2.2 方法
2.2.1 细胞培养
2.2.2 Real time PCR检测S1PRs表达
2.2.3 S1PR2 cDNA的克隆及克隆载体的构建
2.2.4 S1PR2 cDNA真核表达载体构建
2.2.5 S1PR2过表达A549细胞系建立
2.2.6 S1PR2在2种胃癌细胞迁移活性中的作用
2.2.7 S1PR2在SGC-7901细胞中抑制细胞迁移的信号通路研究
2.2.8 数据分析
三.结果
3.1 细胞中S1PRs的mRNA表达情况
3.2 胃癌细胞迂移活性检测
3.2.1 SGC-7901细胞迁移活性检测
3.2.2 BGC-803细胞迁移活性的检测
3.3 人鞘氨醇-1-磷酸2型受体S1PR2真核表达载体的构建
3.3.1 人鞘氨醇-1-磷酸2型受体S1PR2的cDNA克隆
3.3.2 重组质粒pMD19-T-S1PR2的双酶切(SalI和BamHI)鉴定
3.3.3 重组质粒pMD19-T-S1PR2的测序鉴定
3.3.4 表达载体pIRES2-EGFP的双酶切(SalI和BamHI)
3.3.5 重组表达载体pIRES2-EGFP-S1PR2双酶切鉴定
3.3.6 重组质粒pIRES2-EGFP-S1PR2的测序鉴定
3.4 S1PR2过表达A549细胞系的建立
3.4.1 A549细胞中转染表达载体pIRES2-EGFP-S1PR2后荧光显微照相
3.4.2 Real Time PCR相对定量结果
3.5 S1PR2过表达A549细胞迁移活性检测
3.6 SGC-7901细胞标准曲线和生长曲线的绘制
3.6.1 SGC-7901细胞的标准曲线绘制
3.6.2 SGC-7901细胞生长曲线绘制
3.7 S1P/S1PR2抑制人胃癌细胞SGC-7901细胞迁移的信号通路探究
3.7.1 PTX对S1P/S1PR2抑制人胃癌细胞SGC-7901细胞迁移的影响
3.7.2 PD98059对S1P/S1PR2抑制人胃癌细胞SGC-7901细胞迁移的影响
3.7.3 Y27632对S1P/S1PR2抑制人胃癌细胞SGC-7901细胞迁移的影响
3.7.4 BAY对S1P/S1PR2抑制人胃癌细胞SGC-7901细胞迁移的影响
四.讨论
五.结论
参考文献
文献综述
附录
致谢
攻读硕士学位期间发表的论文与参与的科研项目