埃塞俄比亚芥和芥菜型油菜全套染色体精确识别

摘要

埃塞俄比亚芥（Brassica carinata，2n=4x=34）和芥菜型油菜(B.juncea，2n=4x=36)是芸薹属重要的油料和经济作物。相对于芸薹属其他重要成员，如白菜、甘蓝和甘蓝型油菜等，埃塞俄比亚芥和芥菜型油菜的全套染色体精确识别体系还没有建立。
　　本文利用rDNA重复序列（5S rDNA和45S rDNA）、着丝粒重复序列（CentBr1和CentBr2）、亚端粒重复序列pBrSTR以及B基因组特异的重复序列pBNBH35作为探针，通过两次连续的多色荧光原位杂交，使埃塞俄比亚芥和芥菜型油菜的每一条染色体分别呈现出不同的信号特征，了解了这些重复序列在基因组各染色体上的组成和分布，精确地识别了两物种的所有染色体。同时，对四个不同地域来源的埃塞俄比亚芥进行了核型比较，发现这些重复序列在基因组上的组成和分布相对保守，四个不同地域来源的埃芥染色体核型基本一致。
　　此外，利用8个来自B.rapa（2n=2x=20，AA）已知连锁群的BAC克隆，结合我们建立的染色体识别和BAC-FISH技术，发现来源于A基因组的BAC克隆可以在埃塞俄比亚芥的B和C基因组上产生杂交信号。从而找到了B和C基因组来源的部分同源染色体的对应关系;建立了埃塞俄比亚芥染色体识别图和遗传连锁图的联系。
　　最后，利用建立的染色体识别体系，观察了埃塞俄比亚芥花粉母细胞分裂过程中染色体行为，发现减数分裂终变期大多数同源染色体配对形成二价体，也有少数部分同源染色体形成三价体、四价体、多价体。

目录

声明

摘要

缩略词表

一、前言

1．1 植物染色体辨认技术的发展

1．1．1 传统的核型分析

1．1．2 染色体带型分析

1．1．3 利用荧光原位杂交技术的染色体辫认

1．2 植物染色体辨认技术的应用

1．2．1 物种进化方面的研究

1．2．2 细胞分裂期染色体行为的研究

1．2．3 基因组结构和着丝粒功能方面的研究

1．2．4 染色体附加系识别方面的应用

1．3 埃塞俄比亚芥和芥菜型油菜

1．3．1 埃塞俄比亚芥菜和芥菜型油菜简介

1．3．2 禹氏三角成员染色体识别研究进展

1．4 本研究目的和意义

1．4．1 研究目的

1．4．2 研究意义

二、材料与方法

2．1 实验材料

2．1．1 植物材料

2．1．2 引物和BAC克隆

2．1．3 工具酶和试剂

2．1．4 仪器和设备

2．2 实验方法

2．2．1 染色体制片

2．2．2 植物DNA提取

2．2．3 BAC质粒的提取

2．2．4 PCR扩增重复序列

2．2．5 探针标记

2．2．6 荧光原位杂交及信号检测

2．2．7 二次杂交及信号检测

三、结果与讨论

3．1 埃塞俄比亚芥和芥菜型油菜染色体核型分析

3．1．1 埃塞俄比亚芥染色体核型分析

3．1．2 芥菜型油菜染色体核型分析

3．2 基于BAC-FISH的埃塞俄比亚芥染色体命名

3．3 不同地域来源埃芥和芥菜型油菜核型比较

3．3．1 不同地域来源埃芥C基因组核型比较

3．3．2 不同地域来源埃芥和芥菜型油菜B基因组核型分析比较

3．4 细胞分裂过程中埃芥染色体行为观察

3．4．1 减数分裂过程中埃芥染色体行为观察

3．4．2 有丝分裂过程中埃芥染色体行为观察

3．5 讨论

3．5．1 埃芥B基因组染色体与A基因组连锁群的关系

3．5．2 BAC-FISH的次级信号问题

结论

参考文献

发表文章

致谢