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间日疟原虫中国分离株传播阻断疫苗候选抗原Pvs25的基因多态性分析

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前 言

实验材料与方法

实验结果

讨论

结 论

本研究新见解

参考文献

致 谢

综述疟原虫蚊阶段虫体表面蛋白P25和P21/P28与传播阻断疫苗

1疟疾传播阻断疫苗的原理

2传播阻断疫苗的抗原

3啮齿类疟原虫传播阻断疫苗的研究现状及人类疟原虫传播阻断疫苗的开发

4结论

参考文献

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摘要

该论文对中国间日疟原虫单纯流行区湖北、浙江两省31例间日疟原虫分离株的Pvs25全长基因进行了多态性分析,同时与来自孟加拉的分离株进行比较,为间日疟原虫传播阻断疫苗的研制和应用提供必需的前提依据.材料与方法:在疟疾感染流行季节,采集中国间日疟原虫单纯流行区湖北和浙江两省31例疟原虫镜检阳性患者血样,与日本爱媛大学分子寄生虫学教研室坪井敬文教授惠赠的14例孟加拉分离株一同,提取寄生虫基因组DNA.以基因组DNA为模板,选取基因特异性引物(Pvs25 primer sense:5'-CAC TTA GCC AAA ATG AAC TC-3';anti-sense:5'-AAA GGA CAA GCA GGA TGA TA-3').在KOD-Plus聚合酶作用下通过聚合酶链式反应(PCR)扩增Pvs25基因的全长片段,所得PCR产物直接测序,计算机演绎法进行序列分析(软件).结论:1.首次对中国间日疟原虫单纯流行区分离株传播阻断疫苗候选抗原Pvs25的基因多态性特点进行报道.2.中国间日疟原虫单纯流行区分离株传播阻断疫苗候选抗原Pvs25基因多态性有限.在中国相距约1000公里的两个流行区获得的分离株,基因多态性无地理差异性.3.间日疟原虫传播阻断疫苗候选抗原Pvs25在不同地理株之间(中国湖北、中国浙江和孟加拉三地区进行比较)高度保守,基因多态性有限.4.以实验室Sal1株为基础构建的Pvs25重组蛋白产生的抗血清,可完全阻断具有基因多态性的泰国疟原虫自然分离株在蚊胃内的进一步发育.由此提示,以Pvs25为基础构建的传播阻断疫苗在包括中国湖北、浙江等在内的间日疟原虫单纯流行区具有普遍应用的可行性.

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