碱性氨基酸对Hela细胞增殖及其端粒酶活性的影响

摘要

目的：本研究旨在观察精氨酸、赖氨酸、组氨酸等碱性氨基酸对端粒酶活性的影响，为氨基酸与恶性肿瘤发生的关系提供科学依据。　　实验方法：1.Hela细胞的培养：Hela细胞培养于含10﹪胎牛血清RPMI1640(美国GIBICO)培养液中，置于37℃、5﹪CO2、饱和湿度条件下培养。2.细胞增殖的测定(MTT法)。3.端粒酶制备：收集细胞、裂解、离心、取上清部分样品用于蛋白定量。4.端粒重复扩增法(TRAP)：建立TRAP-PCR体系50μl，扩增30个循环。5.PCR产物纯化。6.聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法检测端粒酶活性。7.统计学处理：采用SPSS软件做t检验。　　结论：1.体内L-精氨酸浓度的变化可引起端粒酶活性的改变，提示L-精氨酸引起的细胞增殖和肿瘤的发生发展与端粒酶活性改变有关。2.L-精氨酸使端粒酶活性改变可能不是直接作用于端粒酶而发挥调节作用的，即L-精氨酸可能不是端粒酶活性的直接激活或抑制因素。可能是通过生成多胺、NO等生物活性物质间接影响端粒酶。3.组氨酸、赖氨酸对端粒酶活性没有直接或间接影响。

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综 述端粒酶活性调节的研究进展

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