HLA-B基因多态性在法医学中的应用研究

摘要

本研究目的是设计出一组HLA-B基因特异的SNP位点探针，应用PCR-SSOP法和PCR-RFLP法对中国北方汉族人群进行频率和家系遗传规律调查，获得相关多态性数据；并将探针应用于原位杂交技术中进行非创伤性产前父权鉴定的尝试，为HLA-B基因多态性的进一步应用奠定基础。 方法: 根据已知HLA-B基因序列和各等位基因碱基变异及频率分布的资料，设计2条HLA-B序列特异性DNA探针B009-Z和B095-Z。获得含有第2外显子和第3外显子的HLA-B基因目的片段；筛选最佳斑点杂交条件并通过PCR-RFLP、PCRSSP以及DNA序列测定等方法检验斑点杂交的灵敏度、稳定性和特异性；调查HLA-B基因序列多态性在中国北方汉族人群中的频率分布和家系遗传规律；应用密度梯度离心法富集孕妇(5例)外周血中的有核细胞，制成细胞甩片，与探针B095-Z进行原位杂交，并结合其丈夫斑点杂交结果进行非创伤性产前父权鉴定的尝试。 研究表明:B009-Z和B095-Z特异性强、灵敏度高，可以应用于法医学鉴定。应用NlaⅢ内切酶对HLA-B基因PCR扩增产物进行酶切后获得了系列多态性片段，进一步分析获得了5个相应酶切位点的多态性分布资料及其DP值、PE值和PIC值，为进一步的法医学应用奠定了基础。应用探针B095-Z与孕妇外周血有核细胞原位杂交，进行了非创伤性产前父权鉴定的尝试.

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英文论著摘要

英文缩略语

论文一HLA-B外显子2、3的扩增及序列多态性检验

前 言

实验材料与方法

实验结果

附论文图片

讨 论

结 论

论文二PCR-RFLP法检测HLA-B基因SNP多态性的研究

前 言

实验材料与方法

实验结果

附论文图片

讨 论

结 论

本研究创新性的自我评价

参考文献

综 述一：HLA基因序列研究进展

综 述二：非侵入性产前基因诊断方法的研究进展

在学期间科研成绩

致 谢

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