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人白细胞介素6基因启动子报告载体的构建及作用检测

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综述 雌激素在骨代谢中的作用

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摘要

本文对人白细胞介素6基因启动子报告载体的构建及作用进行了探讨。文章以雌激素对IL-6基因转录调控作用为切人点,构建了人IL-6基因启动子报告载体,并与人雌激素受体表达载体共转染小鼠成骨样细胞,检测了雌激素作用和IL-1诱导对这一报告载体转录活性的影响。研究表明,人IL-6基因启动子分析人IL-6基因的翻译起始点位于转录起始点下游第63个碱基处,其启动子区域存在CREB、C/EBP和NF-κB等重要的反应元件;人IL-6基因启动子萤光素酶报告载体的构建PCR扩增了人IL-6基因启动子,产物长度为222bp(-176~+46)。通过T-A克隆和亚克隆依次构建了人IL-6基因启动子的克隆载体(pMD18sim-hIL6)和萤光素酶报告载体(pGL3-hIL6);雌激素处理抑制IL-1β诱导下pGL3-hIL6报告载体的转录活性在共转染HEO的MC3T3-E1细胞中,IL-1β(5ng/ml)处理使pGL3-hIL6大量表达,而加入不同浓度的17β-E2(10-6、10-8和10-10mol/l)明显抑制了这种诱导作用,其中在10-6mol/l时最显著。

著录项

  • 作者

    吕文军;

  • 作者单位

    中国医科大学;

  • 授予单位 中国医科大学;
  • 学科 外科学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 屠冠军;
  • 年度 2006
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 中文
  • 中图分类 R681.102;R329.26;
  • 关键词

    骨质疏松; 成骨细胞; 破骨细胞; 白细胞介素;

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