水通道蛋白2、内皮素-1在梗阻性黄疸大鼠肾脏表达变化的实验研究

摘要

目的：梗阻性黄疸(OJ)病人围手术期并发症和死亡率较无黄疸者高许多，急性肾功能衰竭(ARF)是其突出的并发症和死亡的重要原因之一，发生率8％-10％，死亡率高达82％<'[1]>。目前临床检测肾功损害的指标是肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)，但往往两者出现改变时肾功损害已较重，给治疗带来困难。既往研究发现在其它原因所致肾功能损害时水通道蛋白2(AQP2)表达减少，在OJ时AQP2如何变化?本文拟通过动物实验来观察AQP2在OJ大鼠肾集合管中表达变化，与通常临床上反映肾功的Cr和BUN进行对比，以期发现肾功损害早期的检测指标，早期发现肾功损害，并采取办法加以预防。以往实验证实内皮素1(ET-1)在OJ大鼠肾和血浆中增加，对肾功能造成损害<'[2]>。但其在肾集合管表达的变化及其对AQP2的影响尚未见报道。本实验拟通过检测：ET-1和．AQP2在肾集合管的表达，以明确两者变化是否相关以及有何相关。 方法 实验选用成年雄性Wistar大鼠80只，分为OJ组、假手术组。OJ组和假手术组再分为3、5、7、10、14天组，每组8只。采用手术方法结扎胆总管造成大鼠OJ模型，并与假手术组对照，分别于术后3、5、7、10、14天处死大鼠，处死大鼠前先抽取腔静脉血5毫升，离心后取上清液待测。取肾脏髓质组织经液氮转运至-80℃冰箱内冻存，采用免疫组化方法检测OJ及假手术组大鼠肾集合管中ET-1和AQP2的表达，同时测定血清直接胆红素(DB)、肌酐(Cr)及尿素氮(BUN)浓度，并对肾脏行光镜下病理形态学观察。 结果 OJ组光镜下见肾集合管上皮细胞肿胀，排列不规整，水样空泡变性、脱落，同时可见局灶上皮细胞坏死，胞浆崩解，间质有大量炎性细胞浸润。OJ组ET-1在肾集合管表达增加在梗阻后3天开始较对照组显著增高(P<0.01)，且随梗阻时间延长而增加更为明显。AQP2在梗阻5天后其表达较假手术组显著减少(P<0.01)，且随梗阻时间延长而减少更加明显。其改变时肾功能损害可从肾集合管形态学改变得到证实。Cr在OJ组术后10天开始升高，而BUN在梗阻14天后开始升高。随着ET-1增加肾功损害加重，AQP2表达减少。他们之间存在负相关。相关系数为-0.94。 结论 1：AQP2在OJ时肾集合管表达从第5天开始减少，Cr在梗阻10天开始增加，BUN在梗阻14天开始增加。 2：AQP2减少先于Cr和BUN改变而改变，可以作为肾功能损害的早期检测指标。 3：ET-1在OJ时肾集合管表达从第3天开始增加，且其增加AQP2表达减少，两者呈负相关。

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综述 梗阻性黄疸对肾功损害及治疗的研究进展

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