蛋白水解诱导因子核心肽mRNA在食管癌组织中的表达

摘要

目的：
　　 恶病质是一种以短期内体重下降，脂肪和肌肉群进行性消耗为特征，即出现碳水化合物、脂质和蛋白质代谢的变化，同时伴有厌食、贫血、浮肿、衰竭等表现的综合征。引发恶病质的具体机制不是很清楚。大多数进展期恶性肿瘤的普遍表现是癌性恶病质的发生发展，它是这些疾病死亡的一个重要的独立因素。在恶病质病人中，骨骼肌萎缩是由于蛋白代谢增加和蛋白合成的减少，两种情况可能同时发生，从而造成严重的肌肉萎。引发恶病质的具体机制不是很清楚。在癌性恶病质中组织代谢所涉及的因子，包括肿瘤坏死因子-α(TNF-α)，白细胞介素-1(IL-1)，白介素-6(IL-6)，干扰素-γ(IFN-γ)，脂解因子锌 α2-糖蛋白，肿瘤特殊产物。但有研究显示血清中TNF-α、IL-1、IL-6和IFN-γ都与患有进展期和终末期癌症的病人的体重减轻无明确联系。蛋白水解诱导因子(proteolysis-inducing factor，PIF)，一种与恶病质病人的体重减轻有关的因子。最开始从MAC16肿瘤模型中分离，人类PIF的同系物随后在体重减轻的恶病质病人的尿液中检出。在体内和体外，PIF都可以引起骨骼肌的蛋白水解。PIF为糖基化的蛋白，分子量约为24kDa，包括一段4kDa的核心肽和碳水化合物残基。一些胃肠道的肿瘤和肿瘤细胞系过量表达PIF蛋白。
　　 人类来源的PIF定义为人类恶病质相关蛋白(HCAP)，在前列腺癌患者检测出它的表达。实验证明仅在前列腺癌细胞系中检测出HCAPmRNA的表达，而在间质组织中没有表达。把这些癌细胞植入小鼠体内，小鼠的体重减轻明显和HCAPmRNA的表达有关。PIF核心肽的基因定位于12号染色体(12q13.1)，并于正常皮肤、乳腺和脑组织以及源于原发和转移肿瘤的各种癌细胞中鉴定出它的转录物。本研究主要通过半定量RI-PCR的方法，检测PIF-CP mRNA在食管鳞状细胞癌肿瘤组织、癌旁组织以及正常组织中的表达情况以及PIF-CP mRNA的表达与肿
　　 方法
　　 提取60例食管癌患者肿瘤组织和癌旁组织的总RNA，同时提取11例食管良性疾病患者的正常食管组织的总RNA。通过测量RNA纯度及浓度，用半定量RT-PCR的方法检测PIF核心肽基因mRNA在食管鳞状细胞癌肿瘤组织癌旁组织以及食管良性疾病手术切除的正常食管组织的表达。根据Genbank人类来源的PIF基因序列(AY590150)设计特异性引物，取10μlPCR产物经1.2％琼脂糖凝胶电泳，GeneFander染色鉴定，凝胶成像分析系统进行拍照、分析。通过软件测量灰度值。以PIF-CP与β-actin之比，作为PIF-CP mRNA的相对的表达量。
　　 结果
　　 用半定量RT-PCR的方法，检测食管癌患者肿瘤组织和癌旁组织及食管良性疾病患者手术切除的正常食道组织的PIF-CP基因的mRNA表达，发现肿瘤组织与癌旁组织中表达水平无明显差异(P>0.05)。尽管在正常组织中也检测出PIF-CPmRNA的表达，但是与肿瘤患者的肿瘤组织和癌旁组织相比表达的水平非常低(P<0.05)。PIF-CP基因mRNA的表达在食管癌的不同分期没有差异(P>0.05)，而且与肿瘤的分化也无相关性(P>0.05)。
　　 结论
　　 PIF-CP基因mRNA在食管癌患者肿瘤组织和正常食管组织的表达没有差异，但是与食管良性疾病的食管组织中PIF-CP基因mRNA的表达有差别。PIF-CP基因mRNA的表达与肿瘤分期和分化没有相关性。

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实验材料和方法

结果

讨论

结论

本研究创新性的自我评价

参考文献

综述

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