IL-22和IL-22受体在寻常型银屑病皮损中的表达

摘要

前言：
　　 银屑病是一种常见的慢性炎症性皮肤病。针对银屑病的发病机制的研究较多。但人们通常认为其中最关键的是T细胞的活化,由活化的T细胞产生的淋巴细胞因子刺激了角质形成细胞的增殖,而增殖的角质形成细胞又释放出了其他的细胞因子,再次增强了活化T细胞的作用。从而形成了一个由T细胞介导的恶性循环。传统学说当中Th1细胞及其所分泌的细胞因子在银屑病的发病过程中起到了极其重要的作用。而Th17细胞的发现对这种传统的观点提出了挑战。IL-22就是Th17所分泌的一个重要的细胞因子。
　　 白细胞介素22(Interleukin-22,IL-22)是一种在鼠的T淋巴细胞内由白细胞介素9诱导所产生的一种新的细胞因子。是IL-10家族当中的一名新的成员,其在人和鼠中均是由179个氨基酸残基所组成,其中包括了4个半胱氨酸。分子量约为20kD。其编码基因在人中定位于染色体12q15,包含了5个内含子与6个外显子,全长约为6kb。
　　 白细胞介素22的受体是由两条链所组成的异源二聚体,分别被称为CRF2-9和CRF2-4,它们均属于Ⅱ型的细胞因子受体家族。其中CRF2-9主要表达在肝、胰、肾、肠等正常组织中,同时在结肠腺癌SW480、肺癌A549与黑色素瘤G321等肿瘤细胞中也有高表达;而CRF2-4则是广泛存在于全身各组织中。
　　 近年来,国内外的多项研究表明IL-22和IL-22受体在自身免疫性疾病、感染性疾病及恶性肿瘤中均有表达。尤其是在寻常型银屑病发病机制的研究当中发现,IL-22及其受体在银屑病患者的外周血中都有高表达。并且其表达的程度与疾病的发病程度有着一定的关系。然而在国内对于IL-22和IL-22受体的研究主要集中在血清学的检测,以免疫荧光法和荧光实时定量PCR法来研究在寻常性银屑病的皮损中IL-22与IL-22R的表达的研究较少。
　　 因此,我们的研究目的是:以免疫荧光法和荧光实时定量PCR法研究IL-22与IL-22受体在寻常型银屑病患者皮损中的表达,并与其在健康人的皮损中的表达进行对照。进而评定IL-22与IL-22受体在寻常型银屑病皮损中的表达。
　　 材料与方法：
　　 一、实验材料
　　 (一)病例与标本
　　 进展期寻常型银屑病皮损冰冻标本31例,女11例,男20例,年龄27～88岁,平均63.54±17.9岁。正常对照皮肤16例,女7例,男9例。年龄49～78岁,平均63.7±8.7岁。寻常型银屑病病例病例均来自中国医科大学附属第一医院皮肤科,经临床、病理检查确诊为银屑病。正常对照系我科皮肤外科患者的正常皮损。
　　 (二)主要试剂
　　 OCT包埋剂(Sakura,Japan)、鼠抗人IL-22单抗(R&D,USA)、鼠抗人IL-22R单抗(R& D,USA)、驴抗鼠IgG的荧光二抗(R&D,USA)、PBS缓冲液、TRNZOL液(Takara)、异丙醇、DEPC水、RT-PCR试剂盒(TAKARA)、IL-22R Real-time引物(上海生工)、β-actin Real-time引物(上海生工)、TE缓冲液、IL-22 Real-time引物(上海生工)
　　 二、实验方法
　　 1.利用荧光实时定量PCR的方法检测进展期寻常型银屑病和正常人的皮损中IL-22mRNA和IL-22RmRNA的相对表达的差异。
　　 2.利用免疫荧光方法对进展期寻常型银屑病和正常人的皮损中的II-22及IL-22受体进行检测,从而比较IL-22及IL-22受体在银屑病人与健康人皮损中的表达差异。
　　 结果：
　　 1、寻常型银屑病进展期患者的皮损中IL-22mRNA和IL-22RmRNA的表达与正常对照组相比明显增高,有统计学意义(P＜0.05)。
　　 2、寻常型银屑病进展期患者的皮损中IL-22及IL-22R的表达与正常对照组相比明显增高,有统计学意义(P＜0.05)。
　　 结论：
　　 1、寻常型银屑病皮损中的IL-22mRNA,IL-22RmRNA的相对表达量呈高表达。
　　 2、IL-22及其受体在寻常型银屑病的皮损中表达升高。
　　 3、提示IL-22及其受体与寻常型银屑病的发病有关。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:英文缩略语

前言

材料与方法

实验结果

讨论

结论

本研究创新性的自我评价

参考文献

综述:白介素22与银屑病的关系

在学期间科研成绩

致谢

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