三种齿科合金诱导L9292细胞凋亡进行Bcl-2家族基因检测

摘要

目的：
　　 生物医用材料中的不锈钢是临床应用中最多,最广泛的一类材料。新型医用高氮无镍奥氏体不锈钢(BIOSSN4高氮无镍奥氏体不锈钢)是中科院金属研究所新近研制的一种医用不锈钢材料。这种材料优良的机械性能已经得到了实验证实,通过检测Caspase-3的表达强度来评价新型医用高氮无镍奥氏体不锈钢的生物相容性,初步证实了该种材料符合临床应用材料的生物相容性要求。本实验通过检测Bcl-2家族基因的表达强度来分析新型医用高氮无镍奥氏体不锈钢,进一步研究这种合金的生物相容性,以期使之更好的应用于临床。
　　 材料与方法：
　　 1.细胞培养
　　 用含10%胎牛血清的RPMI1640细胞培养基在37℃,5%CO2培养箱中培养L929细胞并传代。
　　 2.DAPI染色进行细胞形态学检测
　　 设立实验组(新型医用高氮无镍奥氏体不锈钢组),对照组(317L不锈钢组,金合金组,空白对照组)。用4种液体分别培养L929细胞48h后,进行DAPI染色,荧光显微镜下观察细胞凋亡情况并计算细胞凋亡率。
　　 3.Bcl-2及Bax对合金浸提液的检测
　　 实验组和对照组用3种合金浸提液及空白对照组分别培养L929细胞48h后,进行Bcl-2及Bax检测,流式细胞仪检测荧光强度。
　　 结果：
　　 1.各组细胞于合金浸提液中培养48h后,经DAPI染色后,经荧光显微镜观察均可见凋亡细胞。
　　 2.各组细胞在浸提液的作用下48h之后,Bcl-2的荧光表达强度为:空白对照组＞金合金组＞新型医用高氮无镍奥氏体不锈钢组＞317L不锈钢组;Bax的荧光表达强度为:317L不锈钢组＞新型医用高氮无镍奥氏体不锈钢组＞金合金组＞空白对照组.各组之间荧光表达强度有显著性差异(P＜0.05)
　　 结论：
　　 1.三种材料的生物相容性由好及差依次为:金合金组＞新型医用高氮无镍奥氏体不锈钢＞317L不锈钢。
　　 2.在48h时间段,各组合金Bcl-2的荧光强度与Bax的荧光强度呈相反趋势。
　　 3.Bcl-2家族基因的荧光强度的表达有可能成为评价金属材料生物相容性的参考指标之一。