单次高压氧对持续性局灶性脑缺血大鼠脑梗死体积及Bc1-2/Bax蛋白表达的影响

摘要

目的：
　　 脑组织缺氧后，脑血管代偿性扩张，微血管的渗透性增高，导致脑间质和细胞水肿，组织水肿使毛细血管间距扩大导致血管组织缺氧加重，随着缺血缺氧时间的延长，缺血中心组织逐渐形成不可逆损害。因此，只要能及时的找到改善脑组织缺血缺氧，促进大脑组织功能恢复，减轻脑水肿的有效治疗方法，将有益于改善脑缺血的预后。高压氧(HBO)是指机体在高于标准大气压环境中所呼吸的与所处环境等压的纯氧，而利用吸入HBO治疗疾病的方法则称为高压氧治疗。由于HBO治疗能明显增加机体对氧的摄取和利用，使血氧含量增加，血氧分压增高，氧弥散能力增强，是治疗各种缺氧性疾病的有效措施。且高压氧作为一种安全、可靠、易推广的方法被人们越来越多的认识，但单次高压氧对持续性局灶性脑缺血带来的脑损伤的疗效还未得到确切的认证。本实验利用改良的Zea-longa线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型，探讨单次高压氧对持续性局灶性脑缺血大鼠脑梗死体积及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响，以研究其对持续性局灶性脑缺血模型是否有治疗作用，为临床应用高压氧治疗持续性局灶性脑缺血患者提供实验依据。
　　 方法：
　　 选取清洁级健康雄性SD大鼠48只，随机分为假手术组、缺血对照组、高压空气组及HBO组。采用大脑中动脉(MCA)阻断制作大鼠局灶性脑缺血模型。高压氧组与高压空气组模型成功后即时应用高压氧舱进行治疗，设定参数为升压20分钟，降压20分钟，稳压（2个大气压）70分钟，稳压后高压氧组吸100％纯氧共计60分钟，中间休息两个5分钟。高压空气组在高压舱内全程吸空气，对照组与假手术组相应放置于常温常压下，缺血模型成功后12小时处理取脑，各组分别取6只大鼠用2％ TTC染色分别观察各组大鼠脑梗死体积的大小，采用OSIRIS软件处理，进行定量分析。其余大鼠分别进行固定、包埋、切片，应用免疫组化方法检测大鼠脑组织Bcl-2/Bax蛋白的表达，应用图像分析处理系统对其进行光密度定量分析，实验结果用SPSS13.0统计软件包分析处理。多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较采用t检验，以P＜0.05表示差异有显著性意义。
　　 结果：
　　 假手术组未发现脑梗死灶及Bcl-2/Bax蛋白表达阴性。HBO组、高压空气组、对照组的梗死体积及Bcl-2/Bax蛋白的表达组间比较均无统计学意义(P＞0.05)。
　　 结论：
　　 在本实验条件下，单次高压氧不能减少持续12小时脑缺血大鼠脑梗死体积且不能提高Bcl-2蛋白的表达和减少Bax蛋白的表达。既在本实验条件下，单次高压氧不能抑制持续12小时脑缺血大鼠脑神经细胞凋亡。

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