鼠角质形成细胞与白色念珠菌共培养对巨噬细胞TLR2、TLR4、Dectin-1表达的影响

摘要

目的:
　　通过检测鼠角质形成细胞与白色念珠菌共培养上清液处理过的巨噬细胞的TLR2、TLR4、Dectin-1 mRNA表达水平，明确角质形成细胞与白色念珠菌共培养体系对巨噬细胞模式识别受体表达的影响。
　　方法:
　　取0～3天的C57BL/6J胎鼠，分离角质形成细胞培养至第2代，制备鼠角质形成细胞培养基b液（KC-72h液），鼠角质形成细胞与白色念珠菌共培养基c液（KC-CA-72h液）。白色念珠临床菌株在98℃温度下加热10分钟灭活。取9-12周龄C57BL/6J小鼠股骨、胫骨骨髓细胞分化诱导为成熟M1型巨噬细胞用于本实验。将实验分为:空白对照组、20％b液组、20％c液组，根据分组不同，用不同上清液分别预处理巨噬细胞12小时，收获巨噬细胞，提取RNA，采用real-timePCR在mRNA水平检测Dectin-1、TLR2、TLR4的表达水平。
　　结果:
　　经鼠角质形成细胞与白色念珠菌共培养上清液处理后，巨噬细胞表达Dectin1 mRNA的水平与空白对照组相比减少（P＜0.05）;鼠角质形成细胞上清液能够促进巨噬细胞TLR4 mRNA表达，与空白对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05);经鼠角质形成细胞与白色念珠菌共培养上清液处理后，巨噬细胞表达TLR2、TLR4 mRNA的水平与空白对照组相比，差异无统计学意义（P＞0.05）;鼠角质形成细胞与白色念珠菌共培养上清液处理后与仅经鼠角质形成细胞上清液处理后的巨噬细胞表达的TLR2、TLR4、Dectin1 mRNA水平，差异无统计学意义（P＞0.05）;仅经鼠角质形成细胞上清液处理后巨噬细胞表达TLR2、Dectin1 mRNA的水平与空白对照组相比，差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　结论:
　　鼠角质形成细胞与白色念珠菌共培养能够抑制巨噬细胞Dectin-1 mRNA的表达;仅经角质形成细胞上清液处理过的巨噬细胞，TLR4mRNA表达上升;鼠角质形成细胞与白色念珠菌共培养对巨噬细胞TLR2、TLR4 mRNA的表达无明显影响。

目录

声明

摘要

英文缩略语

前言

材料与方法

一、研究对象

二、实验材料

三、实验仪器

四、实验方法

五、统计学分析

实验结果

一、细胞形态学观察

二、巨噬细胞RNA提取

三、Real-time PCR检测鼠角质形成细胞与白色念珠菌共培养对巨噬细胞TLR2、TLR4、Dectin-1表达的影响

讨论

结论

本研究创新性的自我评价

参考文献

综述 表皮角质形成细胞的培养

致谢

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