GRIM-19蛋白在H2O2诱导的晶状体上皮细胞氧化损伤中表达的研究

摘要

目的:
　　本研究通过观察细胞凋亡相关基因GRIM-19（Geneassociated with Retinoid-Interferon-induced Mortality-19，GRIM-19）在不同浓度H2O2诱导的人晶状体上皮细胞(Human Lens Epithelial Cell，HLEC)氧化损伤中GRIM-19蛋白表达的变化，以揭示GRIM-19是否参与了人晶状体上皮细胞的氧化损伤，为进一步研究GRIM-19是否参与了氧化损伤导致的人晶状体上皮细胞的凋亡及白内障的发生提供一定的理论依据。
　　方法:
　　采用含100ml/L胎牛血清的DMEM高糖细胞培养液对HLEC系SRA01/04进行体外培养;免疫荧光法检测GRIM-19蛋白在正常HLEC中的表达及其在HLEC中的定位;建立HLEC氧化损伤模型:分别用浓度为0、20、100、300、500和800μmol/L的H2O2处理HLEC1h后换培养液，换液后继续孵育6、24h;MTT法检测6h、24h各浓度组的吸光度值，以评估不同浓度H2O2对HLEC的生长抑制作用;Western blot法检测6h各组的GRIM-19蛋白的灰度值，揭示不同浓度H2O2处理的HLEC中GRIM-19蛋白表达的变化。
　　结果:
　　免疫荧光结果示:GRIM-19蛋白主要表达于HLEC细胞质中;MTT结果示:100～800μmol/LH2O2对HLEC有增殖抑制作用，且呈剂量依赖关系，与对照组相比差异有统计学意义（P均＜0.01），20μmol/L组与空白对照组未见明显差异(P＞0.05);Western blot结果示:GRIM-19蛋白在6h各浓度组中相对表达量分别为1.466±0.018,1.509±0.038,1.599±0.014,1.709±0.058,1.813±0.010,1.583±0.021(P＜0.05)，实验组均显著高于空白对照组，正常对照组与空白对照组未见明显差异。
　　结论:
　　正常HLEC中存在GRIM-19蛋白的表达;且GRIM-19蛋白主要表达于正常HLEC的细胞质中。GRIM-19参与了H2O2诱导的HLEC氧化损伤过程。在一定浓度范围内(20～500μmol/L)，GRIM-19蛋白的表达量与H2O2的浓度有剂量依赖关系。

目录

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摘要

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前言

材料与方法

结果

讨论

结论

本研究创新性的自我评价

参考文献

综述 晶状体上皮细胞凋亡及其凋亡调控基因研究进展

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