NADPH氧化酶p22phox亚基基因多态性与缺血性卒中的关联性研究

摘要

目的：
　　脑卒中是一种多因素的复杂疾病，同时又是发病率、致残率及死亡率最高的
　　疾病之一，其中缺血性卒中(ischemic stroke，IS)约占脑卒中的80％。除了一些
　　少见的缺血性卒中，如伴有皮质下梗死和白质脑病的常染色体显性遗传性脑动脉
　　病(cerebral autosomal dominant subcortical infarcts and leukoencephalopathy,CADASIL)、Fabry病、线粒体脑肌病伴高乳酸血症和脑卒中样发作综合征
　　(mitochondrial encephalomyopathy with lactic acidosis and stroke-like episodessyndrome，MELAS)等是单基因病，大部分的脑卒中由多个易感基因和环境因素共同作用引起发病。确定脑卒中的易感基因，从分子水平认识其发病机制，具有重要的临床意义。
　　动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是绝大多数缺血性卒中的病理生理基础，研究发现活性氧(reactiveoxygenspecies，ROS)与AS的发生发展密切相关，而在血管系统中ROS主要来自于烟酸胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)氧化酶系统。NADPH氧化酶p22phox亚基的编码基因为CYBA，其多态性位点rs4673与缺血性脑卒中及冠心病等的相关性，是国内外学者研究的热点之一;另一位点rs3180279是CYBA的标签SNP，目前尚缺乏该位点与缺血性卒中的关联性研究。本研究的目的是采用病例对照的方法研究CYBA基因多态性与缺血性卒中的关系。
　　方法：
　　采用病例对照研究的方法，病例组选取中国北方汉族的284例缺血性脑卒中患者，男性179例，女性105例，平均年龄61.46±10.52岁，同时选取335例年龄及性别与病例组匹配、同为无血缘关系的健康汉族人群为对照组。其中男性234例，女性101例，平均年龄60.17±9.56岁。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerasechainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism,PCR-RFLP)的方法检测CYBA基因rs4673、rs3180279位点的多态性，基因分型结果经双脱氧末端终止测序法确认。采用x2拟合优度检验每个SNP位点的基因型分布是否符合Hardy-Weinberg平衡;应用SPSS17.0统计软件分析病例组和对照组基因型和等位基因的频率分布差异，计算OR值及95％可信区间及P值;应用Logistic回归分析校正传统危险因素如年龄、性别、体重指数、血压、血脂、血糖等混杂因素的影响。
　　结果：
　　1、所有研究对象的每个SNP位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡，即本研究选取的样本具有人群代表性，适合做遗传学分析。
　　2、rs4673位点的基因型频率分布在病例组和对照组中未发现有统计学差异(P＞0.05)，T等位基因的频率比较也无统计学差异。
　　3、rs3180279位点基因型频率、等位基因频率分布在病例组和对照组中未发现有统计学差异(P＞0.05)。在男性病例组和对照组比较中，基因型频率分布有统计学差异(p=0.046)。GC、GG基因型的频率低于对照组，CC基因型的频率高于对照组，基因型频率比较，p=0.034，OR=1.53，95％CI(1.03-2.27)。
　　4、校正年龄、体重指数、吸烟史、高血压、糖尿病、高脂血症等混杂因素后，rs3180279基因型频率分布未发现有统计学差异(p＞0.05)。等位基因频率比较无统计学差异。
　　结论：
　　1、在本研究中CYBA基因的rs4673位点与中国北方汉族人群的缺血性卒中无相关性。
　　2、在本研究中CYBA基因的rs3180279位点GG+GC基因型的男性携带者较CC基因型男性携带者患缺血性脑卒中的可能性更低。

目录

声明

摘要

英文缩略语

前言

材料和方法

一、研究对象

二、研究对象的临床资料采集

三、实验仪器及试剂

四、方法

结果

一、病例组与对照组一般临床资料及血清生化指标比较

二、病例组与对照组CYBA基因两个位点的Hardy-Weinberg平衡检验结果

三、CYBA基因的rs4673、rs3180279位点的酶切基因型判定

四、测序结果

五、病例组及性别亚组与对照组CYBA基因SNPs的基因型及等位基因频率比较

讨论

本研究创新性的自我评价

参考文献

综述 CYBA基因多态性与缺血性脑血管病的相关性研究进展

在学期间科研成绩

致谢

个人简历