血清多种氨基酸联合诊断模型的建立用于慢性肾脏病代偿期的早期发现

摘要

目的：血清肌酐、尿素、胱抑素C是临床实验室评估肾功能的最常用指标，但是我们注意到在慢性肾脏病早期一些患者的血清肾功能指标是完全正常的。改善全球肾脏病预后组织在2012年发布的《慢性肾脏病评估与管理临床实践指南》中将慢性肾脏病按肾小球滤过率分为五期（G1-G5），其中G1期是指存在肾损伤≥3个月，而肾小球滤过率仍然正常的早期患者。如果慢性肾脏病能够早期发现并采取有效措施延缓进展，患者的预后和生存质量将明显提高。肾脏在氨基酸代谢中发挥重要作用，参与部分氨基酸的合成、转运和释放，氨基酸可以反映机体代谢的微小变化并随着肾功能的变化发生改变。本研究旨在发现氨基酸随着肾功能下降的变化趋势，通过建立氨基酸联合预测因子寻找慢性肾脏病代偿期更敏感的氨基酸类生物标志物。
　　方法：研究对象按照估计肾小球滤过率评价的肾功能共分3组，分别是健康对照、慢性肾病代偿期、慢性肾病失代偿期。通过高效液相色谱串联质谱的多反应监测扫描模式对每个患者的11种氨基酸进行定量。数据分析采用SPSS19.0进行，采用Kolmogorov-Smirnov进行正态性检验，非正态分布数据以中位数表示，组间两两比较采用Mann-Whitney U检验，采用二元Logistic回归建立氨基酸辨别慢性肾病的诊断模型，并利用ROC曲线对其诊断效能进行评价。
　　结果：数据分析结果显示随着肾功能的下降，丙氨酸、缬氨酸、酪氨酸逐渐降低，而苯丙氨酸和缬氨酸逐渐增高。采用二元逻辑回归方法建立的多种氨基酸联合诊断模型1包含缬氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸，丙氨酸，用于鉴别慢性肾脏病代偿期的患者与健康对照的准确性、敏感度、特异度分别是87.5％、88.9％、86.7％，优于传统的血清肾功检测指标肌酐、尿素和胱抑素C。而在慢性肾脏病出现明显肾功能下降时，多因素分析二元逻辑回归方法建立的氨基酸联合预测模型2包含了缬氨酸、苯丙氨酸、瓜氨酸、酪氨酸四种氨基酸，敏感性和特异性分别是96.8％、95.6％，特异性与血清肌酐检测相近。
　　结论：体内氨基酸的代谢随着肾功能的下降发生变化，在慢性肾脏病代偿血清学检查正常时，血清氨基酸已发生明显改变，血清氨基酸改变对临床上慢性肾脏病早期的发现提供更多信息。

目录

声明

摘要

英文缩略语

1 前言

2．1 研究对象

2．2 主要试剂和耗材

2．3 仪器

2．4 实验方法

2．4．1 内标准品和日常工作溶液的配制

2．4．2 样本的处理

2．4．3 HPLC-MS／MS条件

2．4．4 氨基酸定量检测

2．4．5 方法验证

2．4．6 统计学分析

3 结果

3．1 随着肾功能逐渐下降，11种血清氨基酸水平和变化趋势

3．2 血清氨基酸与eGFR的关系

3．3 回归模型的建立

3．3．1 模型1(P1)

3．3．2 模型2(P2)

3．4 氨基酸联合预测因子与传统血清肾功检查指标的比较

4 讨论

5 结论

本论文创新性的自我评价

参考文献

综述 氨基酸分析在临床中的应用进展

攻读学位期间取得的研究成果

致谢

个人简历