电位型无标记IgG免疫探针的制备与应用

摘要

用戊二醛交联法在铂电极、银电极上固定IgG抗体,制备了可重复使用的电位型无标记IgG免疫探针.用兔抗小鼠IgG和兔抗人IgG两种抗体制备的铂电极免疫探针,响应时间均小于6min;对IgG的测定范围分别为0.20～1.20ng·mL<'-1>和0.20～0.90ng·mL<'-1>;相关系数分别为0.9984和0.9977;检测下限小于0.20 ng·mL<'-1>.用兔抗小鼠IgG和兔抗人IgG两种抗体制备的银电极免疫探针,响应时间均小于5 min;对IgG的测定范围分别为0.20～1.40 ng·mL<'-1>和0.20～1.20 ng·mL<'-1>;相关系数分别为0.9984和0.9993;检测下限小于0.10 ng·mL<'-1>.从实验结果得出,电位差△E与抗原浓度C之间存在着线性关系.同时通过大量实验,选取0.25M脲、pH=1.9盐酸为铂电极、银电极IgG免疫探针的再生液,免疫探针可分别使用8次、4次.还对电位型无标记IgG免疫传感器的相关知识和理论原理进行了分析和解释.通过对药品和健康人血清的测定,发现该IgG免疫探针具有较好的应用效果,铂、银免疫探针的回收率分别为96％、103％、95％和101％、98％、106％.此外,考察了温度对实验结果的影响(5℃-40℃).根据实验结果,选取30℃为最佳温度来进行实验.

目录

摘要

1前言

1.1免疫传感器的发展及现状

1.2电化学免疫传感器

1.3免疫球蛋白及抗体的产生

1.4抗原

1.5免疫球蛋白的理化性质

1.6抗体和抗原的特异结合

1.7抗体(抗原)的固定化技术

1.8单克隆抗体和多克隆抗体

1.9 IgG的结构

1.10测量IgG的电化学免疫传感器的发展状况

1.11前景与展望

1.12我们的工作

2.实验部分

2.1实验所用仪器与试剂

2.2免疫探针的制备

2.3测定方法

3.结果与讨论

3.1关于免疫探针制备部分的讨论

3.2实验结果与讨论

3.4实际样品的测定结果

3.5健康人血清中IgG的测定

3.6免疫探针的再生

3.7免疫探针的灵敏度

3.8结论及理论分析

致谢

参考文献