糖原磷酸化酶BB型测定与临床应用及亲和层析提纯方法的初步探索

摘要

该文建立一种检测GPBB的新的酶联免疫吸附分析（ELISA）方法---即应用能特异性识别GPBB某一抗原位点的单克隆抗体（McAb）,建立的间接夹心ELISA方法.通过对测定条件的优化,确定了包被用McAb浓度2μg/ml,封闭剂为2﹪BSA,一抗和酶标二抗的工作浓度分别为1：800和1：10000.从临床应用出发,该文对所有的相关试剂进行了稳定性实验,从而确定了各种试剂相应的最佳保存条件：（1）McAb包被：BSA封闭后,4℃放置28天内稳定.（2）一抗：1：800稀释后4℃条件下28天内稳定.（3）酶标二抗：用商品供应的二抗稀释后4℃保存28天内稳定.目前国外虽已有GPBB测定的相关报道,但在国内尚无此诊断试剂,该文应用单克隆抗体建立的间接夹心ELISA测定方法,具有特异性高的优点,从而避免了非特异性反应.应用该法对临床样品测定的结果进一步表明,GPBB对急性心梗有早期诊断意义,排除了脑损伤对它的影响,从而为今后该测定方法的进一步发展提供一定的实验基础.

目录

缩略词表

前言

第一部分间接夹心ELISA方法测定糖原磷酸化酶BB型方法的建立

材料方法

实验方法

结果与讨论

小结

第二部分糖原磷酸化酶BB型检测在临床诊断中的应用

研究对象

研究方法

结果

讨论

小结

第三部分人心肌糖原磷酸化酶BB型亲和提纯方法新探索

材料与试剂

研究方法

结果

讨论

小结

结论

参考文献

综述

致谢