ROCK-I基因表达下调及其对血管平滑肌细胞迁移的抑制作用

摘要

目的：心脑血管疾病已成为威胁人类生命的重要疾病之一。血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell，VSMC)的增生和迁移，是许多心脑血管疾病发生的重要因素之一。Rho/Rho激酶介导的信号转导通路参与了众多血管生理功能的调节，如细胞骨架重组，平滑肌收缩，细胞增生、黏附、迁移以及其他炎症反应过程，而这些细胞功能又与许多血管疾病的发生发展密切相关[1]。 本研究拟采用RNA干扰技术，对ROCK-I基因表达进行下调，研究ROCK-I基因与血管平滑肌细胞迁移的关系。为进一步研究Rho激酶与血管平滑肌细胞迁移的分子机制提供实验依据。 方法：根据大鼠ROCK-I基因参考序列设计合成siRNA，通过实验筛选出有效的siRNA，然后通过脂质体将ROCK-I的siRNA转入A7r5细胞，对于转染后的细胞进行如下实验：1．提取细胞的总RNA，然后做逆转录PCR，在基因水平上检测ROCK-I基因表达下调的情况 2．提取细胞总蛋白，通过蛋白印迹技术，在蛋白水平上检测ROCK-I基因表达下调情况 3．用Boyden微孔膜双槽法进行细胞迁移实验，测定ROCK-I基因表达下调前后细胞迁移率的影响。 结论：通过RNA干扰方法成功地使ROCK-I的基因表达下调，证实ROCK-I基因表达的下调可以抑制血管平滑肌细胞的迁移。这些研究为进一步探讨ROCK-I与血管平滑肌细胞迁移的分子机制提供了实验依据。

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综述：Rho激酶与心脑血管疾病关系的研究进展

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