尿修饰核苷用于肺癌高危人群筛查分子标志物可行性的研究

摘要

目的： 肺癌是最常见的恶性肿瘤之一。该病发病比较隐匿，多数患者在发现时已达晚期，临床治疗效果不佳。早期肺癌治疗效果尚好，故尽早发现是提高肺癌患者生存率的关键。人群普查是发现早期肺癌的重要手段。从普查人群中初筛出肺癌的高危人群，然后对后者做进一步检查，将可能提高肺癌的检出率。因此，急需寻找一种适于从大样本人群中筛查出肺癌高危人群的标志物。修饰核苷(modified nucleosides)是机体RNA代谢产物，不能被细胞再利用，经血液随尿液排出体外。尿中修饰核苷浓度可反映机体RNA代谢速度。细胞增殖旺盛时，RNA代谢速度加快，尿中修饰核苷的浓度随之增高。肿瘤发生发展过程中大量细胞分裂增殖，RNA代谢速度加快，故肿瘤患者尿中修饰核苷浓度将高于正常人。而且，尿样采集过程简便易行、无损伤，易被常人接受。如能确定修饰核苷与肿瘤增殖的关系，尿中修饰核苷将可能成为从大样本人群中筛出肺癌高危人群的标志物。近年来，较多研究表明，白血病、恶性淋巴瘤、鼻咽癌、胃癌及乳腺癌等肿瘤患者尿中修饰核苷浓度高于正常人，但有关肺癌的研究较少。本研究分别检测肺癌患者、肺良性疾病患者和正常人尿中假尿嘧啶核苷(Pseu)、1-甲基腺苷(m1A)、1-甲基次黄嘌呤核苷(m1I)、1-甲基鸟苷(m1G)和2-甲基鸟苷(m2G)五种修饰核苷的浓度，探讨它们作为肺癌高危人群筛查标志物的可能性及其与肺癌病理类型的关系。 方法： 本研究应用高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography，HPLC)在线系统检测了55例肺癌患者、6例肺良性疾病患者与30例正常人尿中Pseu、m1A、m1I、m1G及m2G的浓度，采用SPSS13.0软件对五种修饰核苷在三组人群间的浓度差异进行统计学分析。 结果: 1．肺癌、肺良性疾病患者和正常人尿中，Pseu-浓度分别为33.91±16.50、27.14±7.49和17.87±2.38 nmol/(μmol creatinine)，肺癌组显著高于正常组(P=0.000):m1A浓度分别为5.29±3.55、3.91±1.47和2.31±0.41 nmol/(μmol creatinine)，肺癌组显著高于正常组(P=0.000)：m1I浓度分别为2.13±1.52、1.23±0.42和1.08±0.24 nmol/(μmol creatinine)肺癌组显著高于正常组(P=0.000)；m1G浓度分别为1.07±0.80、0.50±0.14和0.66±0.20 nmol/(μmol creatinine)，肺癌组显著高于肺良性疾病组及正常组(P=0.041，P=0.005)；m2G浓度分别为1.04±0.80、0.72±0.34和0.53±0.15 nmol/(μmol creatinine)，肺癌组显著高于正常组(P=0.001)。 2．鳞癌、腺癌和小细胞肺癌组，m1I浓度分别为1.90±0.97、1.85±1.25和2.88±2.22 nmol/(μmol creatinine)，其中小细胞癌组显著高于腺癌组(P=0.045)。 3．五种修饰核苷对肺癌诊断的贡献性由高到低依次为：m1A、m1I、Pseu、m2G和m1 G。 4．Pseu、m1 A、m1I、m1 G和m2G单项检测对肺癌诊断的敏感度分别为81.82％、85.45％、61.82％、45.45％和58.1 8％，其中Pseu的敏感度显著高于m1I、m1 G及m2G(P=0.020，P=0.000，P=0.007)，m1A的敏感度显著高于m1I、m1 G及m2G(P=0.005，P=0.000，P=0.001)。 5．m1 A、m1I和Pseu三种核苷联合检测对肺癌诊断的敏感度为98.18％，显著高于m1A单项检测的85.45％(P=0.037)。 结论： 1．肺癌患者尿中假尿嘧啶核苷(Pseu)、1-甲基腺嘌呤核苷(m1 A)、1-甲基次黄嘌呤核苷(m1I)、1-甲基鸟嘌呤核苷(m1 G)和2-甲基鸟嘌呤核苷(m2G)浓度显著高于正常人，它们均可用于肺癌高危人群筛选。 2．肺癌患者尿中m1G浓度显著高于肺良性疾病患者，提示检测尿中ml G可能有助于肺癌与肺良性疾病的鉴别。 3．小细胞肺癌患者尿中m1I浓度显著高于肺腺癌患者，提示不同类型肺癌患者尿中的修饰核苷分布可能有所差别，检测尿中修饰核苷浓度可能有助于肺癌的病理分型。 4．m1A、m1I和Pseu三种修饰核苷联合检测可达到对肺癌患者检测的极高敏感度，提示三种核苷联合检测将有助于确定肺癌高危人群。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

附图

综述 尿中修饰核苷作为恶性肿瘤标志的研究

致谢