甘草酸苷对正常人黑素细胞的黑素生成及凋亡的影响

摘要

背景和目的：白癜风是一种色素障碍性疾病，其发病机制尚不十分清楚。其发病机制目前有几种假说，神经化学因子学说，自身免疫学说、黑素细胞自毁学说、遗传学说等。临床表现为局限性或泛发性的色素脱失斑，白癜风皮损病理表现为黑素细胞及黑素颗粒减少，促进黑素生成的药物可能具有治疗作用。 甘草酸苷是从甘草根部中的皂角苷成分中提取的，为一分子甘草次酸和两分子葡萄醛酸的聚合物，在机体内由p-葡萄醛酸苷酶将二者分解。近年来，复方甘草酸苷已广泛应用于皮肤科，有报告临床上使用复方甘草酸苷治疗白癜风患者，另有研究甘草酸苷可以促进B16黑素瘤细胞的黑素含量的合成。Chu等报道，白癜风患者的皮损及血浆和尿液中儿茶酚胺和其代谢产物包括多巴胺都有所增高，多巴胺可以诱导黑素细胞凋亡。为了探讨甘草酸苷对黑素细胞黑素生成的影响，本实验通过进行正常人黑素细胞的原代培养，研究甘草酸苷对黑素细胞黑素生成的作用；并观察甘草酸苷对多巴胺诱导的黑素细胞凋亡的影响。 方法：取6-10岁的儿童术后包皮进行黑素细胞的原代培养并经多巴染色法和免疫细胞化学方法进行鉴定；MTT法检测甘草酸苷对黑素细胞增殖活性、体外氧化DOPA反应方法检测酪氨酸酶活性、NaOH裂解法检测黑素含量；建立多巴胺诱导黑素细胞凋亡模型，用MTT法和流式细胞仪技术观察甘草酸苷对多巴胺诱导黑素细胞凋亡的影响。 结果：MTT结果显示，不同浓度的甘草酸苷对正常黑素细胞的增殖无明显作用（P>0．05）；体外氧化DOPA反应方法测定结果显示甘草酸苷0．2mM、0．5mM、1．0mM和1．5mM均可以促进酪氨酸酶的活性（P<0．05）；NaOH裂解法结果表明甘草酸苷0．2mM、0．5mM、1．0mM和1．5mM均促进黑素细胞黑素含量的合成（P<0．05）。MTT结果表明，500μM多巴胺作用下细胞增殖抑制率为44．60%；电镜下可见凋亡小体；流式细胞术检测可见500μM多巴胺作用下细胞凋亡率为45．48%；MTT和流式细胞仪技术结果显示，甘草酸苷对多巴胺诱导的黑素细胞凋亡无明显抑制作用（P>0．05）。 结论： （1）甘草酸苷对正常人黑素细胞的增殖无明显作用。 （2）甘草酸苷可增强黑素细胞酪氨酸酶的活性和促进黑素细胞黑素含量的合成。 （3）甘草酸苷对多巴胺诱导的黑素细胞凋亡无明显抑制作用。 （4）甘草酸苷可通过增加黑素细胞酪氨酸酶活性来促进黑素生成，对色素减少性皮肤病如白癜风可能具有一定的治疗作用。

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综述19KDa磷蛋白1表达及黑素细胞凋亡的调控

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

附图

致谢