小鼠肠道菌群失衡模型的建立及菌群失衡对肠道机械屏障的影响

摘要

目的： 1.以肠道十四种优势菌群变化情况为依据，建立轻度菌群失衡和重度菌群失衡小鼠模型。 2.研究肠道菌群失衡对小鼠肠粘膜机械屏障的影响，探讨优势菌群与肠道粘膜屏障的相互作用机制。 方法： 1.采用抗生素头孢曲松钠灌胃的方式建立小鼠肠道菌群失衡模型。以头孢曲松钠终浓度5g/kg/d的剂量，连续8天，取盲肠内容物进行肠道菌群分析，建立小鼠轻度菌群失衡模型；以头孢曲松钠终浓度8g/kg/d的剂量，连续8天，分析肠道菌群，建立小鼠重度菌群失衡模型。 2.利用HE染色及电镜技术观察正常组、轻度菌群失衡组、重度菌群失衡组小鼠肠道粘膜绒毛形态变化，用ELISA法检测肠粘膜分泌性免疫球蛋白SIgA分泌量变化，RT-PCR技术及免疫组化法检测肠粘膜粘液素Mucin2、Mucin3，防御素含量的变化。 结果： 1.头孢曲松钠5g/kg/d，连续8天灌胃，肠道优势菌群显著下降，建立轻度菌群失衡小鼠模型；头孢曲松钠8g/kg/d，连续8天灌胃，肠道优势菌群的数量几乎降至零，建立重度菌群失衡小鼠模型。 2.菌群失衡小鼠肠粘膜绒毛出现肿胀、断裂，绒毛顶端肠上皮细胞坏死、脱落，细胞间间隙增宽，胞浆内出现空泡结构，粘膜及粘膜下层有淋巴细胞浸润，重度菌群失衡与轻度菌群失衡小鼠相比较绒毛结构受损加重。 3.菌群失衡小鼠小肠段肠粘膜分泌性免疫球蛋白SIgA分泌水平下降，重度菌群失衡组与正常组比较下降呈显著变化（P<0.05），与轻度菌群失衡组相比下降明显。 4.菌群失衡小鼠粘液层中的粘液素Mucin2、Mucin3、防御素在mRNA水平的表达与正常小鼠相比明显增强，在杯状细胞胞浆内Mucin2蛋白阳性表达增强，且重度菌群失衡组与轻度菌群失衡组小鼠比较，粘液素Mucin2、Mucin3、防御素增强明显。 结论：抗生素干扰肠道优势菌群，建立肠道菌群失衡模型。菌群失衡可导致肠道机械屏障粘膜绒毛结构受损，肠粘膜免疫水平下降，SIgA分泌量随菌群失衡程度呈下降趋势，同时引起粘液层中粘液素和防御素分泌量增加。

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文摘

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声明

综述　肠道菌群与分泌性IgA相互关系的研究进展

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

附录：

致谢