灵芝中三萜类成分及α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

摘要

目的:
　　灵芝为多孔菌科真菌赤芝(Ganoderma lucidum)的干燥子实体。中国药典2010版一部也将紫芝(Ganoderma sinense)的干燥子实体收载于灵芝项下。灵芝药材性平、味甘，归心、肺、肝、肾经;具有补气安神、止咳平喘的功效;用于心神不宁、失眠心悸、肺虚咳喘、虚劳短气、不思饮食。现代药理学研究显示灵芝提取物具有抗肿瘤，降血糖，增强机体免疫力等药理活性。鉴于灵芝药材中的降血糖活性成分尚不明析，本论文结合色谱、波谱技术与α-葡萄糖苷酶抑制模型，对灵芝子实体提取物中的活性成分进行研究，以促进灵芝在降血糖方面的开发应用。
　　方法:
　　1. 本文通过氯仿对灵芝新鲜子实体的提取物进行萃取，进一步通过硅胶柱层析、中压液相（ODS柱）、制备型HPLC对氯仿提取物中的化学成分进行分离、纯化，得到了13个三萜类化合物。
　　2. 通过UV、ESI-MS、HRESI-MS、1H-NMR、13C-NMR、HSQC、HMBC、NOESY等光谱技术对所分离得到的化合物进行了准确的结构鉴定。
　　3. 通过α-葡萄糖苷酶抑制模型对所分离得到的三萜类化合物进行活性评价。
　　结果:
　　本论文采用PH调节萃取、硅胶柱层析、ODS中压柱层析、ODS-preHPLC等手段对灵芝提取物中的三萜类成分进行了系统的分离纯化;通过1D-NMR、2D-NMR、ESIMS、HRESIMS等波谱技术结合文献调研对所得到的化学成分进行准确的结构测定;共分离鉴定了13个羊毛脂烷型三萜及其降碳衍生物，其中化合物1，2为未见报道的新化合物，化合物12为首次从灵芝中分离得到:(1) Ganoderic acid X1,(2) Ganoderic acid X2,(3) Ganoderic acid C,(4) Deacetyl-Ganoderic acid F,(5) Methyl ganoderate E,(6)Ganoderic B,(7)11α-hydroxy-3,7-dioxo-5α-lanosta-8,24(E)-dien-26-oic acid,(8) Lucienic acid A,(9)20(21)-dehydrolucidenic acid A,(10)7-hydroxy-3,11,15-trioxo-lanosta-8-en-24→20s Lactone,(11) Lucidone D,(12) Methyllucidenate D2,(13) Lucidenic acid F。
　　本文通过α-葡萄糖苷酶抑制模型对所分离得到的三萜类化合物进行活性评价。结果显示化合物2，10，11对α-葡萄糖苷酶具有一定的抑制作用IC50均小于200μM，而阳性对照药阿卡波糖的IC50为669.7μM。
　　结论:
　　本文通过硅胶柱色谱、中压液相、高效液相等多种现代色谱分析、分离技术，对灵芝子实体的提取物进行了化学成分研究，分离得到了13个化合物。利用ESI-MS、HRESI-MS、UV、1H-NMR、13C-NMR以及2D-NMR等波谱技术对所分离得到的化合物进行了结构鉴定，其中2个为新化合物，1个为首次从该植物中分离得到。
　　本文通过α-葡萄糖苷酶抑制模型对所分离得到的三萜类化合物进行活性价。结果显示化合物2，10，11对α-葡萄糖苷酶具有一定的抑制作用，效果优于阳性对照药阿卡波糖。
　　上述研究结果表明羊毛脂烷型三萜类成分以及降碳衍生物为灵芝子实体中的主要成分，该类成分对α-葡萄糖苷酶具有一定的抑制作用，具有较好的研究前景。

目录

声明

摘要

前言

材料和方法

1．实验材料及设备

1．1 药材

1．2 仪器

1．3 填料

1．4 试剂

2．方法

2．1 提取分离流程

2．2 化合物的波谱数据

2．3 化合物1-13的α-葡萄糖苷酶抑制作用评价

研究成果

讨论

4．1 新化合物的结构测定

4．2 己知化合物的结构测定

4．3 三萜类成分的α-葡萄糖苷酶抑制活性评价

结论

参考文献

综述 灵芝中三萜类成分及药理活性研究进展

附录

致谢