灵芝中三萜类化学成分及其生物活性研究

摘要

目的:灵芝(Ganoderma lucidum(Leyss.ex Fr.) Karst)为多孔菌科,灵芝属的真菌,在我国分布广范。味甘、性平,具有补气安神,止咳平喘的功效。主治心神不宁,失眠心悸,肺虚咳喘,虚劳短气等。在临床上主要用于糖尿病、肿瘤、肝炎以及高血压的治疗。本论文拟对灵芝药材中的三萜类化学成分和生物活性进行系统研究。
　　方法:本文采用氯仿作为溶剂对灵芝子实体乙醇提取物进行萃取富集,并进一步采用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱、中压柱色谱(ODS)、高效液相柱色谱(HPLC)等色谱方法对氯仿萃取物进行系统的分离纯化,共得到了29个化合物。通过ESIMS、HRESIMS、UV、1H NMR、13C NMR、1H-1H COSY、HMBC、HSQC、NOESY等波谱学方法鉴定了所分离得到的化合物的结构。
　　通过阿霉素耐药的人乳腺癌细胞系(MCF-7/ADR)细胞药物蓄积实验,来测定化合物1-29对P-糖蛋白的抑制作用;同时通过α-葡萄糖苷酶的抑制实验,评价单体化合物对萄糖苷酶的抑制作用。
　　结果:通过波谱技术准确鉴定了29个三萜类化合物的结构,发现16个新的且高度氧化的灵芝三萜类成分,新三萜化合物分别被鉴定为Ganoderlactone A,Ganoderlactone B, Ganoderlactone C, Ganoderlactone D, Ganoderlactone E,Ganodernoid A, Ganodernoid B,Ganodernoid C,Ganodernoid D, Ganodernoid E,Ganodernoid F,Ganodernoid G,12-epi-ganoderlactone D,3β-hydroxyganodernoid D,3β-hydroxy-12β-acetoxyganodernoid D,12β-hydroxyganoderenic F。其中化合物1,5,22,26表现出显著的P-糖蛋白抑制作用。此外,化合物2,5,10和11也显现出对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。
　　结论:本文通过系统的化学成分研究,揭示了中药灵芝中的新三萜类化学成分,并评价了该类成分的生物活性,为中药灵芝的进一步深入开发奠定了坚实的物质基础。

目录

声明

摘要

(一)前言

(二)材料和方法

1．实验材料与设备

1．1 药材来源及鉴定

1．2 仪器

1．3 色谱填料

1．4 试剂

2．实验方法

2．1 提取分离流程

2．2 灵芝中的四环三萜类成分对α-葡萄糖苷酶抑制活性评价[18,51,52]

2．3 P-糖蛋白抑制活性评价

2．4 分子模型对接实验

(三)研究结果

3．1 新化合物波谱数据

(四)讨论

4．1 新化合物的结构鉴定

4．2 已知化合物的结构鉴定

4．3 灵芝中的四环三萜类成分对α-葡萄糖苷酶抑制活性评价

4．4 灵芝类化合物在阿霉素耐药的人乳腺癌细胞系(MCF-7／ADR)中对P-糖蛋白的抑制作用

4．5 分子模型对接实验的结果

(五)结论

参考文献

综述

附录

附图

攻读学位期间发表论文情况

致谢