不同构型脂联素和二甲双胍对结肠癌细胞的影响及脂联素与代谢综合征相关性研究

摘要

本文分为以下两个部分进行探讨：
　　第一部分 二甲双胍、全长型脂联素及球型脂联素对结肠癌SW480细胞增殖及STAT3/Survivin通路的影响
　　目的:研究Met（Metform，二甲双胍）、f-Ad（full-length Adiponectin，全长型脂联素）及g-Ad（globular Adiponectin，球型脂联素）对人结肠癌SW480细胞增殖及STAT3（Signal Transducers and Activators of Transcription，信号转导子与转录活化子3）、Survivin（生存素）蛋白表达的影响，探讨三种药物可能的抗肿瘤作用机制及意义。
　　方法:体外培养人结肠癌细胞SW480，用不同浓度f-Ad和g-Ad(5μ g/ml、10μ g/ml、20μ g/ml)、Met（5mmo l/L、10mmol/L、20mmol/L）干预，CCK-8法检测各组细胞增殖情况。用20μg/ml f-Ad、20μg/ml g-Ad、20mmol/L Met分别干预结肠癌SW480细胞48h后，Western Blot检测对照组及f-Ad、g-Ad、Met干预组STAT3、Survivin蛋白表达水平的变化。
　　结果:1.CCK-8法检测细胞增殖结果显示:不同浓度f-Ad、g-Ad(5μg/ml、10μ g/ml、20μ g/ml)和Met(5mmol/L、10mmo l/L、20mmol/L)干预SW480细胞48h后，与对照组相比，各组细胞的生长均受到不同程度抑制，且呈剂量依赖性，Met组抑制作用最明显，g-Ad组次之，f-Ad组较弱。
　　2.Western Blot法检测STAT3及Survivin蛋白表达结果显示:20μ g/mlf-Ad、20μg/ml g-Ad、20mmol/L Met分别处理结肠癌SW480细胞，药物作用48h后，与未处理组相比，Met组及g-Ad组STAT3蛋白相对表达量下降（P＜0.05)，f-Ad组下降不明显(P＞0.05)，三组Survivin相对表达量均下降（P＜0.05)。
　　结论:1、Met、f-Ad、g-Ad对结肠癌SW480细胞系的生长具有抑制作用，在一定浓度范围内，呈剂量依赖性。
　　2、Met、f-Ad、g-Ad对结肠癌SW480细胞系的抑制作用，主要通过抑制细胞增殖、降低凋亡抑制蛋白的表达。
　　3、f-Ad抑制Survivin蛋白表达，Met、g-Ad抑制Survivin、STAT3蛋白表达，即Met、g-Ad的抑制作用通过STAT3/Survivin信号通路。
　　第二部分 结直肠癌患者的代谢综合征相关指标与脂联素水平的相关性分析
　　目的:分析结直肠癌患者的代谢综合征相关指标与血清脂联素水平之间的关系，分析结直肠癌患者的代谢综合征相关指标与癌组织中脂联素mRNA表达水平之间的关系，从而探讨结直肠癌患者的代谢综合征与脂联素水平的相关性及意义。
　　方法:选取课题组收集的80名结直肠癌患者病例资料，分析其腰围、体重指数、血压、空腹血糖、血清脂联素、高密度脂蛋白、甘油三酯等指标，及用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测得到的结直肠癌组织中脂联素mRNA表达水平的相互关系。按照血清脂联素及癌组织中脂联素mRNA表达水平由低到高均分成4组（Q1-Q4），每组20人，按照是否患有代谢综合征分成2组（代谢综合征组17例，非代谢综合征组63例），用单因素方差分析法比较各组空腹血糖、血压、腰围、甘油三酯、高密度脂蛋白、糖化血红蛋白、脂联素等指标的差异，用Pearson相关分析癌组织脂联素mRNA表达水平与其他指标的关系。
　　结果:1.在结直肠癌患者的代谢综合征各组分中，腰围及血压异常的人数居多，且多数患者具有1～2项异常指标，男性各组分异常的人数普遍较女性多，其中甘油三酯及高密度脂蛋白异常的男性明显多于女性。
　　2.随着血清脂联素水平增高，体重指数及腰围递减，Q1、Q2、Q3组体重指数和腰围的下降程度与Q4组相比有明显差异（P＜0.05）;空腹血糖、胰岛素抵抗指数、糖化血红蛋白随着血清脂联素升高也有所降低，Q2组与Q4组比较有明显差异（P＜0.05）;血清甘油三酯、高密度脂蛋白、舒张压及收缩压在四组间的差异没有统计学意义（P＞0.05）。
　　3.随着癌组织脂联素mRNA水平增高，腰围、收缩压、舒张压、胰岛素抵抗指数呈升高趋势，仅收缩压在Q2组与Q1组比较有明显差异（P＜0.05）.其余指标的组间差异均无统计学意义（P＞0.05）;空腹血糖、糖化血红蛋白呈下降趋势，但四组间的差异均无统计学意义(P＞0.05）;血清甘油三酯、高密度脂蛋白、体重指数无明显变化趋势，且四组间的差异没有统计学意义（P＞0.05）。
　　4.代谢综合征组的血清脂联素和高密度脂蛋白明显低于非代谢综合征组（P＜0.001），代谢综合征组的腰围和胰岛素抵抗指数明显高于非代谢综合征组（P＜0.001），代谢综合征组的体重指数高于非代谢综合征组（P＜0.01），代谢综合征组的空腹血糖和糖化血红蛋白高于非代谢综合征组（P＜0.05），而代谢综合征组的癌组织脂联素mRNA、血压、血清甘油三酯虽略高于非代谢综合征组，但差异没有统计学意义（P＞0.05）。
　　5.癌组织脂联素mRNA表达水平与年龄、血压、血脂、体重指数、腰围、空腹血糖、胰岛素抵抗指数、糖化血红蛋白均无相关性(P＞0.05)。
　　结论:1.在结直肠患者中，随着血清脂联素水平升高，体重指数、腰围、空腹血糖、胰岛素抵抗指数和糖化血红蛋白呈降低趋势，甘油三酯、高密度脂蛋白、血压无明显变化。
　　2.在结直肠患者中，癌组织脂联素mRNA表达水平与年龄、血压、血脂、体重指数、腰围、空腹血糖、胰岛素抵抗指数、糖化血红蛋白均无相关性。
　　3.结直肠癌伴代谢综合征者比不伴代谢综合征者血清脂联素水平低，而癌组织脂联素mRNA水平在两者中无明显差异。

目录

声明

摘要

前言

第一部分 二甲双胍、全长型脂联素及球型脂联素对结肠癌SW480细胞增殖及STAT3／Survivin通路的影响

材料与方法

1、实验材料

2、实验方法

3、统计学分析

结果

讨论

结论

参考文献

第二部分 结直肠癌患者的代谢综合征相关指标与脂联素水平的相关性分析

对象与方法

1、研究对象

2、实验方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述 脂联素与肥胖相关结直肠肿瘤的关系研究进展

附录

攻读学位期间发表论文情况

致谢