葛根提取物对酒精中毒小鼠的保护作用

摘要

酒精中毒是指由于过量饮酒导致的一种精神或身体健康问题，主要对肝脏和大脑神经系统造成严重损伤，临床表现有酒精性肝病和行为意识障碍等，通常还会伴随酒精上瘾、学习记忆功能障碍等症状。酒精中毒发病机制复杂不清，迄今为止临床上对于预防和治疗酒精中毒的药物尚且缺乏。葛根的主要活性成分是异黄酮类物质，其药理作用十分广泛，古医书《本草纲目》等记载称葛根具有解酒保肝之功效，但目前临床研究和应用较少，具体作用效果及其作用机制尚待探究。本实验分别研究了葛根提取物对急性和慢性酒精中毒保护作用，并对其作用机制进行了初步的探究。 （1）本实验首先用一定浓度酒精灌胃小鼠建立急性酒精中毒小鼠模型，再给予葛根提取物预处理治疗来探究其作用及机制。结果发现葛根提取物能够延长醉酒耐受时间和缩短醒酒所需时间，降低血液中酒精浓度；还能够提高小鼠肝脏中ADH和ALDH的活力，有效降低小鼠脑组织中β-EP和DOR的水平；此外病理学检测也说明其对脑组织和肝组织细胞损伤起到一定保护作用。 （2）为了进一步探究葛根提取物对慢性酒精中毒肝损伤的作用效果和其作用机制，我们建立了慢性酒精肝损伤模型，并检测了小鼠的体重、肝指数、血清血脂水平、抗氧化水平和ADH活力等指标。实验结果显示，葛根提取物改善了小鼠体重、肝指数的变化和肝功能指标AST、ALT和ALP异常；对酒精诱导提高的血脂指标TC和TG起到了下调作用，同时有效提高了抗氧化指标GSH、GST和T-AOC的水平和显著增强了肝脏中ADH活性。 （3）最后我们对葛根提取物的慢性酒精中毒脑损伤保护作用进行了研究，结果显示葛根提取物有效降低了大脑皮层caspase-3的表达量；行为学检测说明了葛根提取物能够改善慢性酒精导致的小鼠学习记忆功能障碍；此外葛根提取物促进了中脑TH的表达，其变化情况和学习记忆功能具有相关性。 以上结果表明，酒精能对机体的肝脏和脑组织等造成了严重损伤，葛根提取物对急性和慢性酒精中毒均起到了保护作用，有效改善了酒精的损伤，具体的作用机制可能与酒精代谢酶活性提高、抗氧化水平的提高和delta阿片系统作用相关。

目录

声明

摘要

英文略缩词表

引言

1 文献综述

1.1 酒精中毒

1.1.1 酒精中毒的概述

1.1.2 酒精代谢过程

1.1.3 酒精中毒的损伤

1.1.4 酒精中毒发病机制

1.1.5 酒精中毒治疗进展

1.2 葛根

1.2.1 葛根的概述

1.2.2 葛根的药理作用

1.2.3 葛根的研究进展

1.3 本文选题依据与研究内容

2 葛根提取物对急性酒精中毒小鼠的保护作用

2.1 引言

2.2 实验材料与设备

2.2.1 实验材料

2.2.2 实验仪器

2.3 实验方法

2.3.1 小鼠分组及急性酒精中毒模型建立

2.3.2 血清及组织匀浆的制备

2.3.3 翻正反射实验检测

2.3.4 血液中酒精浓度的测定

2.3.5 肝脏中ADH活力的测定

2.3.6 肝脏中ADLH活力的测定

2.3.7 脑组织中β-EP的测定

2.3.8 RNA的提取

2.3.9 RNA的浓度及质量检测

2.3.10 反转录

2.3.11 石蜡切片的制备

2.3.12 HE染色

2.3.13 数据统计学的分析

2.4 实验结果

2.4.1 小鼠酒精处理后一般形态表现

2.4.2 葛根提取物对小鼠醉酒和醒酒时间的影响

2.4.3 小鼠血液中乙醇浓度的检测

2.4.4 葛根提取物对急性酒精中毒小鼠肝脏ADH和ALDH活性的影响

2.4.5 葛根提取物对急性酒精中毒小鼠脑组织中DOR在mRNA水平的影响

2.4.6 葛根提取物对急性酒精中毒小鼠脑组织中β-内啡肽的影响

2.4.7 葛根提取物对急性酒精中毒小鼠组织形态学的影响

2.5 讨论

2.6 小结

3 葛根提取物对慢性酒精中毒小鼠肝损伤的保护作用

3.1 引言

3.2 实验材料与设备

3.2.1 实验材料

3.2.2 实验仪器

3.3 实验方法

3.3.1 小鼠分组及慢性酒精中毒肝损伤模型建立

3.3.2 血清及肝匀浆的制备

3.3.3 肝组织HE染色

3.3.4 血清中AST和ALT活性的测定

3.3.5 血清中ALP活性的测定

3.3.6 血清中总胆固醇（TC）含量测定

3.3.7 血清中甘油三酯（TG）含量测定

3.3.8 血清中高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量的测定

3.3.9 肝脏中GSH含量的检测

3.3.10 肝脏中谷胱甘肽-S-转移酶（GST）活力的测定

3.3.11 肝脏中总抗氧化能力（T-AOC）含量的检测

3.3.12 小鼠肝脏组织中ADH活性的测定

3.3.13 数据统计学的分析

3.4实验结果

3.4.1 葛根提取物对慢性酒精中毒小鼠体重的影响

3.4.2 葛根提取物对慢性酒精中毒小鼠肝指数的影响

3.4.3 葛根提取物对慢性酒精中毒小鼠肝脏组织形态学的影响

3.4.4 葛根提取物对慢性酒精中毒小鼠血清肝功能指标的影响

3.4.5 葛根提取物对慢性酒精中毒小鼠血清中脂质代谢物含量的影响

3.4.6 葛根提取物对慢性酒精中毒小鼠肝脏中ADH活力的影响

3.4.7 葛根提取物对慢性酒精中毒小鼠肝脏中抗氧化指标的影响

3.5 讨论

3.6 小结

4 葛根提取物对慢性酒精中毒小鼠脑损伤的保护作用

4.1 引言

4.2 实验材料与设备

4.2.1 实验材料

4.2.2 实验仪器

4.2.3 主要试剂配置

4.3 实验方法

4.3.1 小鼠分组及慢性酒精中毒模型建立

4.3.2 水迷宫实验

4.3.3 蛋白免疫组化

4.3.4 数据统计学的分析

4.4 实验结果

4.4.1 葛根提取物对慢性酒精中毒小鼠大脑皮层caspase-3蛋白表达的影响

4.4.2 葛根提取物对慢性酒精中毒小鼠学习记忆功能的影响

4.4.3 葛根提取物对慢性酒精中毒小鼠中脑TH蛋白表达的影响

4.4.4 中脑TH的表达量与水迷宫逃避潜伏期相关性分析

4.5 讨论

4.6 小结

结论

展望

参 考 文 献

致谢

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