马瑞原油和溢油分散剂对斑马鱼胚胎发育的毒性效应

摘要

船舶运输业的快速发展，使得海上溢油事故也随之增加，对水生生物及周围环境造成了很大影响。溢油分散剂作为处理溢油的常用手段，会加快溢油的消失速度，但加入溢油分散剂是否会增加对水生生物的毒性的问题也一直存在。本文研究了马瑞原油水容组分(Water-accommodated Fractions，WAF)、加入溢油分散剂的化学增强型水容组分(Chemically Enhanced WAF，CEWAF)和GM-2溢油分散剂暴露0～120hpf(hour post-fertilization)对斑马鱼(Danio rerio)胚胎的影响。通过致死率、孵化率、致畸率、斑马鱼形态学评分系统(General morphology score system，GMS)和心率，评估WAF和CEWAF暴露对斑马鱼胚胎发育的毒性效应。研究结果如下:
　　(1)暴露于WAF和CEWAF导致了斑马鱼胚胎——幼鱼致死率增加和孵化下降，且二者变化程度均随暴露时间的增长和稀释比的增加而增大。CEWAF的致死率和孵化率均高于对应稀释比WAF。
　　(2)WAF和CEWAF会引起斑马鱼胚胎——幼鱼出现发育畸形和心率下降，随着稀释比的增加致畸率和心率分别上升和下降。CEWAF心包水肿和卵黄水肿的致畸率高于对应稀释比的WAF;背部畸形和尾部畸形的致畸率低于对应稀释比的WAF。WAF的心率均高于对应稀释比的CEWAF。GM-2溢油分散剂溶液对心率有一定抑制作用，但其影响低于CEWAF。
　　(3)WAF和CEWAF会引起斑马鱼胚胎——幼鱼GMS得分下降，随着稀释比的增加GMS得分逐渐下降，这表明WAF和CEWAF会诱导胚胎发育延迟;CEWAF暴露诱导的发育缓慢程度要大于对应稀释比WAF;观察发现，WAF和CEWAF对行动、卵黄吸收、鱼鳔发育和孵化的影响最大。
　　(4)CEWAF中的总石油烃(Total Petroleum Hydrocarbons，TPH)和总多环芳烃（Polycyclic Aromatic Hydrocarbons，PAHs）浓度高于对应稀释比WAF。

目录

声明

摘要

第1章 绪论

1．1 溢油污染来源及现状

1．2 溢油在水体中的存在形态及迁移转化

1．3 溢油分散剂在水体溢油中的应用

1．3．1 溢油分散剂的作用机理及发展史

1．3．2 溢油分散剂的优缺点

1．3．3 溢油分散剂在国内外的使用情况

1．4 原油对水生生物的影响及研究进展

1．4．1 原油对鱼类毒性效应研究进展

1．4．2 原油对其他水生生物毒性效应研究进展

1．5 经溢油分散剂处理过的原油对水生生物的影响及研究进展

1．5．1 经溢油分散剂处理过的原油对鱼类毒性效应研究进展

1．5．2 经溢油分散剂处理过的原油对其他水生生物毒性效应研究进展

1．6 斑马鱼及其相关的毒理学研究

1．6．1 斑马鱼简介

1．6．2 斑马鱼胚胎发育和畸形的评分系统

1．6．3 斑马鱼在毒理学中的研究进展

1．7 研究目的、内容及技术路线

1．7．1 研究目的

1．7．2 研究内容

1．7．3 技术路线

第2章 材料与方法

2．1 实验材料

2．1．2 实验受试油品及溢油分散剂

2．1．3 实验用水及试剂

2．1．4 实验仪器

2．2 受试溶液的制备

2．2．1 WAF的制备

2．2．2 CEWAF的制备

2．3．1 斑马鱼胚胎的收集

2．3．2 胚胎的急性暴露

2．3．3 致死率

2．3．4 形态学评估

2．4 总石油烃(TPH)的测定

2．4．1 油标准曲线的绘制及WAF中TPH的测定

2．4．2 油+溢油分散剂标准曲线的绘制及CEWAF中TPH的测定

2．5 检测样品中多环芳烃(PAHs)的含量

2．5．1 样品处理

2．5．2 气相色谱／质谱检测样品中PAHs的含量

2．6 数据分析

第3章 结果与讨论

3．1 马瑞原油WAF和OEWAF暴露对斑马鱼胚胎——幼鱼致死率的影响

3．1．1 WAF暴露对斑马鱼胚胎——幼鱼致死率的影响

3．1．2 CEWAF暴露对斑马鱼胚胎——幼鱼致死率的影响

3．2 马瑞原油WAF和CEWAF暴露对斑马鱼胚胎孵化率的影响

3．2．1 WAF暴露对斑马鱼胚胎孵化率的影响

3．2．2 CEWAF暴露对斑马鱼胚胎孵化率的影响

3．3 马瑞原油WAF和CEWAF暴露对斑马鱼胚胎——幼鱼致畸率的影响

3．3．1 WAF暴露对斑马鱼胚胎——幼鱼致畸率的影响

3．3．2 CEWAF暴露对斑马鱼胚胎——幼鱼致畸率的影响

3．4 马瑞原油WAF和CEWAF暴露对斑马鱼胚胎——幼鱼发育的影响

3．4．1 WAF暴露对斑马鱼胚胎——幼鱼发育的影响

3．4．2 CEWAF暴露对斑马鱼胚胎——幼鱼发育的影响

3．5 马瑞原油WAF和CEWAF暴露对斑马鱼胚胎——幼鱼心率的影响

3．6 水样分析

3．6．2 WAF和CEWAF中PAHs含量的变化

3．7 讨论

结论

展望

参考文献

攻读学位期间公开发表论文

致谢

作者简介