血脂康预处理对在体大鼠心脏缺血—再灌注损伤心肌Fas/FasL表达的影响

摘要

目的:探讨血脂康预处理对在体大鼠心脏急性缺血-再灌注心肌Fas/Fas通路的影响。
　　 方法:雄性SD大鼠随机分成5组:假手术组,双蒸水灌胃1周；模型对照组,双蒸水2ml灌胃1周；甲羟戊酸组,甲羟戊酸150mg/kg.d溶于2ml双蒸水灌胃1周；血脂康组,血脂康原粉2.8g/kg.d溶于双蒸水配成悬液灌胃1周；血脂康+甲羟戊酸组,血脂康原粉2.8g/kg.d联合甲羟戊酸150mg/kg.d溶于双蒸水灌胃1周。预处理1周后缺血-再灌注模型大鼠用4-0无创手术丝线结扎左冠状动脉前降支缺血30min,再灌注120min。假手术组仅穿线而不结扎前降支,其他手术步骤同缺血-再灌注组。再灌注120min后取腹主动脉血检测CK值,用TNEL法检测左心室心肌细胞凋亡,RT-PCR和Western blot检测各组左心室心肌Fas/FasL的表达。
　　 结果:共用SD大鼠75只,其中8只因冠脉结扎失败和27只因死亡未观察到实验终点而被剔除实验。与假手术组比较,模型对照组、血脂康组、血脂康+甲羟戊酸组和甲羟戊酸组血清CK均明显升高(P<0.01)；与模型对照组相比,血脂康组CK升高幅度较小(P<0.01):而CK在甲羟戊酸组、血脂康+甲羟戊酸组和模型对照组两两比较均无统计学差异(P＞0.05)。假手术组中的SD大鼠心肌细胞偶有凋亡,缺血-再灌注损伤引起心肌细胞凋亡增加。血脂康组同模型对照组、血脂康+甲羟戊酸组或甲羟戊酸组相比心肌细胞凋亡均减少(P<0.01),但仍比假手术组心肌细胞凋亡增多(P<0.01)；而血脂康+甲羟戊酸组、甲羟戊酸组和模型对照组心肌细胞凋亡两两比较无差异(P＞0.05)。与模型对照组、血脂康+甲羟戊酸组和甲羟戊酸组比较,血脂康组SD大鼠心肌Fas/FasL表达显著减少(P＜0.01)；模型对照组、甲羟戊酸组和血脂康+甲羟戊酸组Fas/Fas[,表达两两比较均无差异(P>0.05)。
　　 结论:血脂康减轻心脏缺血-再灌注损伤；对缺血-再灌注损伤心肌的保护作用是血脂康中含有的他汀类成分起的作用；血脂康减少缺血-再灌注损伤心肌Fas/FasL的表达,这可能是血脂康抑制心肌细胞凋亡的机制。

目录

文摘

英文文摘

英文缩略词表

第1章 前言

第2章 材料

2.1 实验动物

2.2 实验药品与试剂

2.3 分析系统软件

2.4 溶液的成份、配制方法

2.5 特异性引物序列

2.6 主要仪器设备

第3章 实验方法

3.1 动物分组与预处理

3.2 缺血-再灌注损失模型复制

3.3 检测血清肌酸磷酸激酶(CK)

3.4 TUNEL

3.4.1 载玻片的处理

3.4.2 制作石蜡切片

3.4.3 原位TUNEL

3.4.4 结果判定

3.5 RT-PCR

3.5.1 总mRNA提取

3.5.2 逆转录反应

3.5.3 扩增反应

3.5.4 电泳

3.6 Western blot

3.6.1 蛋白提取

3.6.2 紫外吸收法测定样品中蛋白浓度

3.6.3 SDS-聚丙烯凝胶电泳

3.7 统计分析

第4章 结果

4.1 心电图改变

4.2 模型复制失败及原因

4.3 血清CK的变化

4.4 心肌细胞凋亡

4.5 心肌组织Fas/FasL mRNA的表达

4.6 心肌组织Fas/FasL 蛋白的表达

第5章 讨论

第6章 结论

致谢

参考文献

附图

综述

参考文献

攻读期间研究成果