二氧化硒对人耐顺铂卵巢癌裸鼠皮下移植瘤作用的实验研究

摘要

目的： 用SKOV3/CDDP耐药细胞株建立人卵巢癌SKOV3/CDDP耐药细胞株动物模型，通过观察二氧化硒合并顺铂组裸鼠皮下耐药细胞株SKOV3/CDDP移植瘤的生长情况，分析皮下移植瘤组织P-糖蛋白表达和肿瘤细胞凋亡率，初步探讨二氧化硒对卵巢癌顺铂耐药的增敏作用机制。 方法： 将人卵巢癌SKOV3/CDDP细胞接种于20只SPF级雌性BALB/C裸鼠皮下，待瘤长成约为10mm×10mm时，随机分成对照组和治疗组，对照组给予生理盐水0.4ml/只，治疗组分为顺铂组（DDP组），腹腔内注射DDP3mg/kg0.2ml+生理盐水0.2ml；二氧化硒组（SeO2组），每只裸鼠腹腔内注射SeO230ug/0.2ml+生理盐水0.2ml；顺铂联合二氧化硒组（SeO2+DDP组），每只腹腔内注射DDP3mg/kg0.2ml+SeO230ug/0.2ml。每三天腹腔给药一次，共四次。观察各组肿瘤成瘤率、平均抑瘤率以及不同处理组对裸鼠体重、食欲及精神状态的影响。测量每次给药后瘤体体积变化，绘制肿瘤生长曲线；并取各组瘤体组织标本分别行病理检查，用流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡率，免疫组化法检测肿瘤细胞P-gp的表达。 结果： 各组裸鼠成瘤率均为100％。SeO2组及SeO2+DDP组对移植瘤的生长有明显抑制作用，与其它组比较有显著性差异（P<0.05）。DDP组、SeO2组、SeO2+DDP组的平均抑瘤率分别为41.69％、48.29％、72.28％，联合用药组与其他治疗组比较有显著性差异（P<0.05）。各组肿瘤平均细胞凋亡率分别为5.2％、24.1％、25.9％、45.43％，且联合用药组S期细胞明显减少。SeO2组、SeO2+DDP组P-gp的阳性表达水平明显低于DDP组及对照组（P<0.05），其阳性表达率（对照组、DDP组、SeO2组、SeO2+DDP组）分别为：59.85％、50.41％、35.67％、22.33％。 结论： 1.顺铂联用二氧化硒对于耐药卵巢癌生长具有明显的抑制作用；2.二氧化硒有增强卵巢癌对顺铂的敏感性，可以减轻顺铂化疗引起的副作用；3.二氧化硒和顺铂对诱导耐药卵巢癌细胞凋亡可能有协同作用；4.二氧化硒能降低P-糖蛋白的阳性表达水平，这可能是增加耐药卵巢癌对顺铂敏感性的重要机制之一。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略语表

声明

第1章引 言

第2章材料和方法

2.1材料

2.1.1实验对象

2.1.2主要试剂

2.1.3主要仪器

2.2方法

2.2.1试剂配制

2.2.2卵巢癌耐药细胞株SKOV3/CDDP培养

2.2.3裸鼠耐药移植瘤动物模型的构建

2.2.4实验分组及处理

2.2.5免疫组化法检测

2.2.6流式细胞仪检测凋亡

2.3统计学处理

第3章结果

3.1人卵巢癌裸鼠耐药细胞瘤模型的建立

3.2各组裸鼠重量及瘤体体积的变化

3.3药物对裸鼠的行为影响

3.4瘤体组织解剖及病理染色结果

3.5免疫组化染色P-gp的表达

3.6流式细胞学结果

第4章讨论

第5章结论与展望

致谢

参考文献

附 图

综述：栖化合物降低卵巢癌耐药作用

攻读学位期间的研究成果