兔眼青光眼小梁切除术联合羊膜包裹巩膜瓣术式的实验研究

摘要

目的：研究兔眼青光眼小梁切除术联合羊膜包裹巩膜瓣术后的羊膜及手术方式对滤过道瘢痕形成的影响。
　　 方法：健康成年新西兰大白兔，雌雄兼有，随机选一批兔进行左眼急性闭角型青光眼造模，造模成功后随机选35只兔进行分组，15只兔左眼行单纯的青光眼小梁切除术，编为A组，随机选15只兔左眼行青光眼小梁切除术联合羊膜包裹巩膜瓣术编为B组。造模的5只兔为空白对照组C组。本实验观察兔共为35只。A、B组分别于术后第1d、3d、7d、14d、28d裂隙灯下观察兔术眼滤过泡形态、并发症及眼压变化。于术后1d、3d、7d、14d、28d每组随机取3只兔子处死，摘除左眼球，取手术滤过道及周围组织，用甲醛溶液固定，行HE染色和免疫组织化学染色。光镜下观察滤过道成纤维细胞数量和增殖情况以及b-FGF、TGF-β2、CTGF、的阳性表达。用免疫荧光技术观察手术区a-SMA的阳性表达。
　　 结果：1、眼压：A、B组在造模前后眼压有显著的差异性(p<0.05)；术前和术后眼压亦有显著的差异(p<0.05)；术后各时间点及A、B组间眼压无显著的差异(P<0.05)。2、滤过泡：术后1d、3d、7d，A、B两组滤过泡均为功能滤过泡，到术后14dA组6只兔中有5只兔的滤过泡为功能滤过泡，B组6只兔中有1只兔的滤过泡为功能滤过泡，到术后28dA组3只兔中有3只兔的滤过泡为功能滤过泡，B组3只兔均无功能滤过泡，进行统计学分析两组功能滤过泡数量有差异(p<0.05)。3.并发症：B组术后3d3只兔出现炎症反应，A组术后3d2只兔出现浅前房。4.HE染色：A组术后1d手术区可见少量的炎性细胞，3d手术区可见大量的淋巴细胞，7d滤过区可见少量的淋巴细胞浸润，羊膜未见溶解，保持完整，成纤维细胞开始增生，滤过道周围出现呈梭形的成纤维细胞，滤过道保持开放状态；术后14d有功能滤过泡兔滤过道周围可见少量胶原纤维及成纤维细胞均匀，羊膜已经不完全溶解，瘢痕开始形成，滤过道大部分保持开放状态；术后28天滤过道完全形成，小部分滤过道呈关闭状态。B组术后1d和3d手术区可见炎性细胞的量逐渐增多，7d滤过区可见大量的炎性细胞浸润，成纤维细胞开始增殖，滤过道周围出现较多的成纤维细胞比A组多，胶原纤维增多，滤过道呈开放状态；术后14d滤过区炎性细胞数量减少，大量的胶原纤维堵塞滤过道，排列紊乱，瘢痕也已形成，滤过道基本保持开放状态，术后28天滤过道周围可见大量的胶原纤维，部分滤过道被胶原纤维堵塞，滤过道狭窄。5.免疫组化染色结果示：两组术后7d b-FGF、TGF-β2、CTGF表达处于高峰状态，阳性率最高，术后7d后阳性率逐渐下降，A组阳性率的表达低于B组，两组比较有显著差异性(p<0.05)。6.α-SMA在A组术后阳性表达率比B组术后的阳性表达率低。
　　 结论：1.兔眼青光眼小梁切除术联合羊膜包裹巩膜瓣术能够有效的降低眼压。2.兔眼青光眼小梁切除术联合羊膜包裹巩膜瓣术后可以减少成纤维细胞的增殖，使滤过道瘢痕化程度降低。3.碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)、转化生长因子(TGF-β2)、纤维结缔组织生长因子(CTGF)在青光眼滤过道手术后对瘢痕的形成有一定的促进作用。4.兔眼青光眼小梁切除术联合羊膜包裹巩膜瓣术后能降低碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)、转化生长因子(TGF-β2)、纤维结缔组织生长因子(CTGF)、α-SMA的表达。5.转化生长因子(TGF-β2)表达量的多少直接影响到CTGF的表达量，两者之间的表达量呈正相关性。