羟基脲衍生物抗L1210、K562肿瘤细胞作用研究及其安全性评价

摘要

目的：检测羟基脲衍生物的体外抗肿瘤活性，筛选出体外对肿瘤细胞有杀伤作用的化合物；观察有杀伤力的羟基脲衍生物对肿瘤细胞凋亡的影响；观察HY-D11和HY-D10单次经口给药对NIH小鼠的毒性反应和大致的死亡情况，确定最大耐受剂量(MTD)，为长期毒性试验及临床安全用药提供参考。
　　 方法：(1)以L1210肿瘤细胞、K562肿瘤细胞为模型，采用MTT法对课题组合成的羟基脲衍生物进行体外抗肿瘤活性筛选，从中筛选出对L1210细胞、K562细胞有杀伤作用的化合物，并计算出各化合物对各肿瘤细胞的IC50值。(2)对筛选出的对细胞有杀伤作用的化合物进行抗肿瘤作用机制初步研究，采用瑞氏染色法观察化合物对肿瘤细胞形态学的影响，AnnexinV-FITC检测试剂盒检测化合物诱导肿瘤细胞凋亡的作用。(3)以NIH小鼠为实验动物，以不同剂量的HY-D11和HY-D10经口给药小鼠，建立小鼠HY-D11和HY-D10中毒模型。通过对一般症状、体重、耗食量结果及组织病理学方面的观察，进行较为系统的研究，观察HY-D11和HY-D10单次经口给药对NIH小鼠的毒性反应和大致的死亡情况，确定最大耐受剂量(MTD)，为长期毒性试验及临床安全用药提供参考。
　　 结果：(1)从课题组合成的羟基脲衍生物中筛选出19种化合物对L1210细胞有较好的抗肿瘤活性，5种化合物对K562细胞有较好的抗肿瘤活性，计算得到每种化合物对L1210细胞或K562细胞的半数抑制率IC50值；(2)实验发现，L1210细胞在羟基脲衍生物HY-11作用24h后凋亡率均比阳性对照药物HU高；作用于K562细胞24h时，高剂量(10-3M)YL3对K562细胞的凋亡率大于对照药物HU，在作用48h后，对K562细胞诱导凋亡率均高于对照组HU。(3)急性毒性试验结果：①HY-D11以最大给药量(8g/kg·bw)单次经口给药，导致NIH小鼠20只动物出现2只动物死亡，3只动物出现尾尖至尾跟部坏死，血痂形成，1只动物出现足心坏死，血痂形成，最大耐受量约为8g/kg·bw；②HY-D10以最大给药量(5.6g/kg·bw)单次经口给药，对NIH小鼠未见明显毒性，最大耐受量>5.6g/kg·bw。