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HSP60在糖尿病大鼠晶状体上皮细胞上的表达及意义

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第1章 前言

第2章 材料与方法

2.1 实验材料

2.1.1 实验动物

2.1.2 主要试剂

2.1.2 主要自配溶液

2.1.3 主要实验仪器设备

2.2 实验方法

2.2.1 实验动物模型的建立

2.2.2 观察项目

2.2.3免疫组织化学检测

2.2.4Western-blot检测 HSP60

2.2.5 Western-blot检测Caspase-3

第3章 结果

3.1各组大鼠的血糖及一般情况

3.2.免疫组织化学实验结果

3.3 Western-blot检测实验结果

3.3.1 Western-blot检测HSP60

3.3.2Western-blot检测caspase-3

第4章 讨论

4.1白内障的发病机制

4.2 STZ-糖尿病大鼠模型的建立

4.3热休克蛋白

4.3.1热休克蛋白60(HSP60)

4.4 caspase-3

4.4 总结

第5章 结论

致谢

参考文献

综述

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摘要

目的:
  观察HSP60在早期糖尿病大鼠晶状体上皮细胞上的表达及其对晶状体上皮细胞调亡的影响,探讨HSP60在糖尿病性白内障病变中的作用。
  方法:
  鼠龄为6-8周的SD大鼠随机分成糖尿病组及对照组,每组18只,糖尿病组在禁食12h后一次性腹腔注射l%STZ诱发糖尿病模型,成功诱导成糖尿病模型后4、8、12周分别应用免疫组织化学法及Western-blot分析晶状体上皮细胞上HSP60的表达及表达量的变化。晶状体上皮细胞(SRA01/04细胞)在含20%胎牛血清的低糖(5.5 mmol/L)DMEM培养液中培养传代后加入高渗葡萄糖(25mmol/L)的培养液,分为两组,其中一组加入10mg/L HSP60蛋白,培养72h后Western-blot检测caspase-3的含量。
  结果:
  在正常组大鼠晶状体上皮细胞上未发现有HSP60表达,糖尿病组大鼠在4周、8周、12周均可见晶状体上皮细胞上有HSP60表达,且4周和8周时表达量无明显差异(P>0.05);而12周时其表达量开始减少,统计学有显著差异(P<0.05)。细胞培养结果显示,加入HSP60蛋白后,晶状体上皮细胞中caspase-3的表达量下降。
  结论:
  早期糖尿病大鼠晶状体上皮细胞有大量HSP60表达,而且随着时间的延长,表达量呈下降趋势;且对高渗糖诱导的晶状体上皮细胞调亡有保护作用。

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