羊膜移植联合丝裂霉素C治疗角膜缘干细胞缺乏症的临床观察

摘要

目的：
　　观察羊膜移植联合丝裂霉素 C对眼表物理或化学伤后角膜缘干细胞缺乏导致的假性胬肉和（或）睑球粘连的治疗效果以及手术前后眼表形态的改变。
　　方法：
　　本文选取从2011年2月1日至2014年6月30日期间因眼表物理、化学伤后角膜缘干细胞缺乏导致的假性胬肉和（或）睑球粘连的病人，在眼外伤至少一个月之后施行羊膜移植手术，术中联合应用丝裂霉素C。手术后，绷带加压包扎患眼，连续2天。之后局部用妥布霉素滴眼液和玻璃酸钠滴眼液，开放点眼，连续1周。之后用复方妥布霉素滴眼液（4次/日，2周后减量至2次/日）和复方妥布霉素眼膏（1次/日）1个月。手术后10-14天，羊膜达到上皮化后拆除术口缝线。所有病人在第1天，手术后1周及第1个月，3个月，6个月，12个月后分别进行裂隙灯显微镜检查并拍照。在病人手术后第3个月，对中央角膜和角膜缘进行激光扫描共聚焦显微镜检查；分别采集中央角膜和角膜缘的脱落上皮细胞，进行PAS染色和免疫荧光染色检查。
　　结果：
　　本文选取病例共18人，18只眼。男性17人，女性1人。平均年龄32.61±11.96岁（10到54岁）。其中化学伤的有8人8眼，热烧伤的有10人10眼。Ima geJ软件统计分析眼前段图片，被结膜纤维血管组织侵犯的角膜缘占整个角膜缘的平均比例是57.11±18.85％（23.97-88.54%）。术后随访时间22.72±11.43月（9至47月）。其中2例病人分别于术后第18天和第21天复发，之后施行全角膜移植手术，术后常规抗炎及抗免疫排斥治疗；其余16例病人术后无复发。观察手术前与手术后第3个月视力变化，中央角膜和角膜缘上皮细胞形态，结果如下：
　　1、视力：术前LogMAR最佳矫正视力为0.74±0.53。术后随访时间22.72±11.43月（9至47月）。12眼（75%）术后视力提高，术后LogM AR最佳矫正视力为0.52±0.46。术后Log MAR最佳矫正视力与术前最佳矫正视力比较，两者差异有统计学意义(t=2.39，P=0．03)。
　　2、激光扫描共聚焦显微镜检查：中央角膜和角膜缘上皮细胞形态正常，角膜缘Vogt栅栏样结构消失。
　　3、印迹细胞学检查：中央角膜和角膜缘上皮PAS染色均未见杯状细胞。中央角膜上皮细胞高表达CK12，角膜缘靠近角膜侧的上皮细胞少量表达CK12。
　　结论：
　　1、羊膜移植联合丝裂霉素C对眼表化学伤或热烧伤后角膜缘干细胞缺乏导致的假性胬肉和（或）睑球粘连的治疗有效。
　　2、少量的健康角膜缘组织残留，通过羊膜移植改善眼表环境后可以实现角膜缘干细胞的自体扩增，最终达到全角膜表面上皮化表型。
　　3、阻挡结膜组织侵入角膜生长的物理屏障可能不仅仅是角膜缘Vogt栅栏结构，角膜缘上皮细胞、角膜上皮细胞以及结膜上皮细胞之间的相互抑制作用可能也参与阻挡结膜对角膜的侵入性生长。

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第1章 前言

第2章 材料和方法

2.1病例来源

2.2病例筛选办法

2.3所需仪器

2.4所需试剂与耗材

2.5 溶液配制

2.6羊膜移植术联合丝裂霉素C

2.7术后处理

2.8激光扫描共聚焦显微镜检查

2.9眼表脱落上皮细胞的收集方法

2.10 PAS染色

2 . 11 免疫荧光染色

2.12统计方法

第3章 结果

3.1视力检查

3.2眼表情况

3.3激光扫描共聚焦显微镜检查

3.4 PAS染色结果

3.5 免疫荧光染色

第4章 讨 论

4.1手术前后眼表形态改变

4.2 角膜缘干细胞缺乏的临床治疗

4.3 羊膜移植治疗角膜缘干细胞缺乏的机制

4.4丝裂霉素C在眼科的应用

第5章 全文总结

第6章 问题与展望

致谢

参考文献

综述: 角膜缘干细胞缺乏的诊疗进展