车前子质量标准及车前素药代动力学研究

摘要

车前子-中医临床常用中药之一。本论文对车前子的化学成分、车前子的质量标准以及车前素药代动力学进行研究，对阐明中药材车前子的化学成分，建立质量标准具有重要意义；同时也阐明了车前子中车前素的药代动力学规律，为车前素的开发和物效基础的研究提供重要的科学依据。
　　本论文取得如下成果：
　　1、车前子化学成分研究
　　30 kg车前子中药材经粉碎机粉碎后用75％乙醇回流提取，所得提取物分别用三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取。正丁醇部位采用几种柱层析、反相中压液相、薄层色谱、制备型高效液相等方法，从中分离得到7个化合物，利用波谱解析和理化分析，确定其结构分别为：毛蕊花糖苷(1)、5,7-二羟基色原酮(2)、异香草酸(3)、异毛蕊花糖苷(4)、桃叶珊瑚苷(5)、车前素(6)、京尼平苷酸(7)，其中化合物异香草酸为首次从车前子中分离得到。
　　2、车前子质量标准的研究
　　首次建立了车前子中车前素的薄层鉴别方法，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸(10:0.5:2)为展开剂展开，碘化铋钾-碘化钾碘(1:1)试液为显色剂显色。结果：薄层色谱法能快速鉴别检出车前素。该方法经方法学考察，稳定性好，可用于车前子的薄层鉴别。
　　采用高效液相色谱法测定车前子中车前素、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的含量。采用CAPCELL PAK C18 MGⅡ S5色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)；以甲醇(A)-水(B)为流动相，梯度洗脱(0～45 min，25%A→42%A)；流速为1.0 mL/min；检测波长为210 nm；柱温为30℃。结果：车前素、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷在0.04491~0.8982μg(r=0.9999)、0.2117~4.2338μg(r=0.9999)和0.01688~0.3376μg(r=1.0000)进样范围内与峰面积呈现良好的线性关系。平均回收率(n=6)分别为99.3%、100.0%和99.1%，RSD分别为0.52%、0.18%和1.9%。该方法分离效率高，重复性好，经方法学验证，可用于车前子药材的质量控制。
　　3、车前素的药代动力学研究
　　本文首次建立测定大鼠血浆中车前素的超高效液相色谱-串联质谱方法并将其应用于车前素的药代动力学研究。以原阿片碱为内标，Phenomenex? Luna-C18 column(2.1 mm×150 mm,3.0μm)为色谱柱，乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱，流速为0.4 mL/min，运行时间为7 min。采用正离子检测模式、电喷雾离子源及MRM扫描模式：车前素:m/z226.2→84.2；内标:m/z354.2→188.9。车前素标准曲线为1~1000 ng/mL(r=0.9962)，平均回收率大于88.6%，最低检测限为0.1 ng/mL，日内、日间精密度RE为-8.6%~4.9%。因此，所建立的分析方法可成功用于口服20 mg/kg及静脉注射5 mg/kg车前素的药代动力学研究。药动学结果表明，车前素在大鼠体内可被迅速吸收且缓慢消除，口服绝对生物利用度高达70.1%。

目录

中英文缩略词表

第1章 引言

1.1 中药质量标准简介

1.2 中药药代动力学简介

1.3 本课题的立题依据、研究内容及创新之处

第2章 车前子的化学成分研究

2.1 植物材料来源

2.2 实验仪器

2.3 实验材料与试剂

2.4 提取与分离

2.5 结构鉴定

2.6 本章小结

第3章 车前子质量标准研究

3.1 样品收集情况

3.2 薄层色谱鉴别

3.3 含量测定

3.4 本章小结

第4章 车前子中车前素的药代动力学研究

4.1 实验材料

4.2 实验方法与结果

4.3 讨论

4.4 本章小结

第 5 章 结论与展望

致谢

参考文献

附图

攻读学位期间的研究成果

综述:车前子研究概述