木犀草苷上调14-3-3η蛋白保护心肌细胞抗缺氧/复氧损伤

摘要

目的：
　　木犀草苷（Luteoloside, Lut）是一种广泛存在于中草药中的黄酮类化合物，具有保护心血管的作用。本实验对H9c2心肌细胞进行Lut预处理，建立缺氧/复氧（anoxia/reoxygenation，A/R）损伤模型，研究Lut对受到缺氧/复氧损伤的心肌细胞的保护作用，并且探究Lut的保护作用是否与影响14-3-3η蛋白的表达有关。
　　方法：
　　本实验采用H9c2细胞，对其进行Lut预处理并构建A/R模型。利用MTS法检测细胞存活率；分光光度计法检测乳酸脱氢酶（LDH）的释放；Western blot法检测14-3-3η蛋白的表达水平；流式细胞技术测定细胞内的活性氧（ROS）水平；分光光度计法检测线粒体通透性转换孔（mPTP）的开放程度、半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）的活性；Western blot法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达水平；流式细胞技术测定细胞凋亡程度。
　　结果：
　　各实验组细胞经过缺氧/复氧处理后：
　　1.预处理Lut提高H9c2细胞存活率，降低LDH活性；
　　2.预处理Lut增加H9c2细胞内14-3-3η蛋白表达量；
　　3.预处理Lut降低H9c2细胞内ROS水平；
　　4.预处理Lut减弱H9C2细胞内mPTP开放程度；
　　5.预处理Lut降低H9c2细胞内Caspase-3活性；
　　6.预处理Lut上调Bcl-2蛋白的表达，下调Bax蛋白的表达；
　　7.预处理Lut减少H9c2细胞凋亡率。以上结果皆具有统计学意义（P＜0.01）。
　　结论：
　　木犀草苷能够通过上调14-3-3η蛋白保护H9c2心肌细胞抗A/R损伤，且该保护作用涉及到线粒体途径。

目录

声明

英文缩写及全称和中文对照表

第1章 引言

第2章 材料与方法

2.1 主要材料及试剂

2.2 实验主要仪器及设备

2.3 实验方法

2.4 数据处理

第3章 结果

3.1 预处理Lut对A/R损伤后H9c2细胞存活率及LDH释放的影响

3.2 预处理Lut对A/R损伤后H9c2细胞内14-3-3η蛋白表达的影响

3.3 预处理Lut对A/R损伤后H9c2细胞内ROS水平的影响

3.4 预处理Lut对A/R损伤后H9c2细胞内mPTP开放的影响

3.5 预处理Lut对A/R损伤后H9c2细胞内Caspase-3活性的影响

3.6 预处理Lut对A/R损伤后H9c2细胞内Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

3.7 预处理Lut对A/R损伤后H9c2细胞凋亡的影响

第4章 讨论

第5章 结论与展望

5.1 结论

5.2 展望

致谢

参考文献

攻读学位期间的研究成果

综述:木犀草苷的药理作用概述