重组人角质细胞生长因子-2对烟雾吸入性损伤兔肺保护作用及其机制的研究

摘要

目的：研究重组人角质细胞生长因子-2（rhKGF-2）对烟雾吸入性损伤兔肺组织保护作用及其可能机制。
　　方法：新西兰大白兔120只制成烟雾吸入性损伤模型，随机分成五组，每组24只：0mg/kg组（对照组）：致伤兔不作处理；PBS组：致伤后4h，雾化吸入磷酸缓冲盐溶液（PBS）5ml，每日1次，连续7日；1mg/kg组：致伤后4h，雾化吸入rhKGF-2（1mg/Kg，溶于5ml PBS），每日1次，连续7日；2mg/kg组：致伤后4h，雾化吸入rhKGF-2（2mg/Kg，溶于5ml PBS），每日1次，连续7日；5mg/kg组：致伤后4h，雾化吸入rhKGF-2（5mg/Kg，溶于5ml PBS），每日1次，连续7日；每组分别于治疗1d、3d、5d、7d天随机抽取一只动物，抽动脉血行血气分析，放血处死动物，取肺泡灌洗液测定 IL-6、IL-8、IL-10、MCP-1水平，取气管及肺组织行病理检查，并测定肺组织内 NF-κB、表面活性蛋白A(SP-A)、血管内皮生长因子（VEGF）、磷酯酰肌醇3-激酶(P13K)、蛋白激酶B(Akt)及 Bcl-2蛋白水平的蛋白及基因表达水平。TUNEL检测肺组织细胞凋亡情况。
　　结果：（1）各组动物伤后1天，PaO2均处于较低水平，随着时间的延长， PaO2有升高的趋势，但各时点间无明显差异（P＞0.05）；各剂量治疗组均可以明显提高PaO2（P〈0.01），但对PH、PaCO2、HCO3等无明显影响（P＞0.05）。（2）病理检查结果表明，伤后1天，气管粘膜肿胀、上皮细胞脱落，粘膜下见大量炎性细胞浸润；肺部水肿、出血，肺泡内可见大量炎性渗出，肺间质及肺泡内可见大量炎性细胞存在。（3）雾化吸入 rhKGF-2后，肺泡灌洗液中 IL-6、IL-8水平下降，以5mg组较为显著，IL-10升高不明显，各治疗组对MCP-1影响不大（P＞0.05）。（4）雾化吸入rhKGF-2后，NF-κB的蛋白水平及基因表达均出现下降，以5mg组为佳。（5）雾化吸入rhKGF-2后，肺组织中SP-A、VEGF蛋白逐渐升高，以5mg组动物明显，但Akt、PI3K的蛋白在治疗期间未见明显改变（P＞0.05）。（6）雾化吸入rhKGF-2后，肺组织中SP-A、VEGF、PI3K、Akt RNA表达明显增强，以5mg组动物明显；SP-A、VEGF、PI3K表达增强与剂量相关，但 Akt RNA表达明显增强与剂量的高低无明显关系。（7）雾化吸入 rhKGF-2后，肺组织中 Bcl-2表达明显；细胞凋亡减少，2mg组、5mg组动物肺组织中Bcl-2的含量升高，但各时点1mg组动物与对照组比较无明显差异（P＞0.05）；肺组织中Bcl-2 RNA表达增强，但组间差异不明显。
　　结论：雾化吸入 rhKGF-2可以改善烟雾吸入性损伤兔的氧合，减轻肺部炎症反应，并促进气道的修复，减少细胞凋亡，高剂量组表现更佳。其作用机制可能与下调NF-κB、激活PI3K/Akt通路及上调Bcl-2的表达有关。

目录

声明

中英文缩略词表

第1章 引言

1.1 概述

1.2 角质细胞生长因子-2

1.3 KGF-2对肺组织发育的作用

1.4 国内外KGF-2在烧伤及肺损伤中的应用研究

1.5 KGF-2在吸入性损伤研究中的空白点

1.6 对KGF-2对吸入性损伤的研究设想

1.7 KGF-2 对吸入性损伤研究中的简要方案

1.8 对KGF-2对吸入性损伤的预期研究结果及意义

第2章 烟雾吸入性损伤模型的建立

2.1 材料和方法

2.2 结果

2.3 讨论

第3章 rhKGF-2对烟雾吸入性损伤兔肺组织NF-κB信号通路的影响

3.1 材料和方法

3.2 结果

3.3 讨论

第4章 rhKGF-2对烟雾吸入性损伤兔肺组织PI3K/Akt信号通路的影响

4.1 材料和方法

4.2 结果

4.3 讨论

第5章 雾化吸入rhKGF-2对烟雾吸入性损伤兔肺组织细胞凋亡的影响

5.1 材料和方法

5.2 结果

5.3 讨论

第6章 结论与展望

6.1 结论

6.2 进一步工作的方向

致谢

参考文献

攻读学位期间的研究成果

综述:细胞因子在烧伤治疗中的研究进展