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ATP-敏感性钾通道开放剂尼可地尔改善高同型半胱氨酸血症的冠心病患者冠脉微循环的机制研究

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中英文缩略词表

前言

参考文献

第一部分 高同型半胱氨酸加重心梗后小鼠的冠脉微循环损害

一.材料与方法

1 实验动物

2. 主要仪器设备及耗材

3.购置试剂

二.实验方法

1. 溶液配制

2 血浆中Hcy测定

3 小鼠无创血压测定

4 小鼠心肌梗死模型的制备

5心脏彩色超声评估心梗后各组小鼠心功能变化

6. TTC 染色

7 小鼠心脏标本处理及病理切片制作

8 CD31荧光染色

9 采用番茄凝集素评估给予心梗后心肌微血管功能

三.统计学处理

四、结果

4.1 一般情况

4.2 心梗模型

4.3 TTC染色结果

4.4 心功能测定

4.5 心肌免疫荧光染色

4.6 心梗模型后小鼠生存率观察

4.7 番茄凝集素染色

五.讨论

六.结论

参考文献

第二部分 尼可地尔预处理对合并HHcy小鼠心梗后冠脉微循环的保护作用

前言

一、材料与方法

1. 实验动物

2. 实验所需设备及仪器

3. 主要试剂

二、实验方法

2.1 动物分组

2.2 心脏彩超

2.3心梗后小鼠死亡率的比较

2.4 CD31染色

2.5 番茄素凝集素染色

2.6免疫组织化学染色(HE和HBFP染色)

三、数据处理

四. 结果

4.1小鼠心梗模型后生存率观察

4.2心功能测定

4.3缺血心肌 HBFP 染色结果

4.4 心肌组织HE染色形态学观察

4.5 缺血心肌血管内皮细胞染色

4.6 番茄凝集素染色

五.讨论

结论

参考文献

第三部分 尼可地尔对HHcy冠脉微循环障碍的保护的机制研究

前言

一.材料与方法

1试剂与材料

2 主要仪器设备

3.主要试剂

二.实验方法

2.1 动物试验部分共两部分

2.2. CD31染色

2.3. 番茄凝集素染色

2.4. SDS-PAGE 凝胶电泳

2.5.生化指标采集及测定

2.6 ELISA试剂盒检测IL-1β水平

2.7 ELISA 试剂盒测定IL-6水平

2.8 细胞培养

2.9 同型半胱氨酸(Hcy)对HCAECs的干预

2.10 MTT 法测定细胞存活率

2.11 测定 LDH 含量

2.12 细胞总蛋白提取

2.13 小管形成试验

2.14 细胞划痕实验

2.15 RT-PCR检测

2.16 细胞上清液NO的检测

三.统计学处理

四.结果

动物部分:4.1尼克地尔处理后各组PI3K/Akt eNOS磷酸化水平

4.2 各组小鼠血浆中ET-1、NO的含量比较

4.3不同浓度的尼可地尔地尔对血浆中IL-1β、IL-6水平的影响

4.4小鼠心梗模型后生存率观察

4.5 缺血心肌血管内皮细胞染色

4.6番茄凝集素染色

4.7 ELISA血浆中的的一氧化氮(NO)

4.8 抑制剂处理后各组小鼠PI3K/Akt/eNOS的表达

细胞部分:4.9最适同型半胱氨酸浓度和缺氧时间的摸索

4.10 尼可地尔对 Hcy和缺氧诱导的HCAECs存活率的影响

4.11尼可地尔对HHcy和缺氧诱导的HCAECs细胞乳酸脱氢酶的影响

4.12 尼可地尔对模型组PI3K/Akt/eNOS通路的影响

4.13 尼可地尔对Hcy和缺氧诱导诱导的HCAECs细胞的NO水平的影响

4.14各组细胞IL-1β和IL-6 mRNA表达水平

4.15加入抑制剂后对PI3K/Akt/eNOS 途径的影响

4.16 划痕试验

4.17 小管成形试验

五.讨 论

六 结论

参考文献

全文总结与展望

本研究的局限性

致谢

攻读学位期间的研究成果

综述:冠状动脉微循环障碍的诊断进展

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