固定化脂肪酶及其在有机酶促反应中的性能研究

摘要

该论文首先对适于固定化细胞的五种霉菌及三种载体进行了选择,通过对酶活及其生物量的考察,确定了中华根霉AS3.817和复合新型无机载体材料羟基磷灰石作为固态培养基 的主要成分:蛋白胨3﹪,蔗糖0.5﹪,硝酸钠0.1﹪,硫酸镁0.05﹪,磷酸二氢钾0.1﹪,2 ﹪橄榄油作诱导物.有机相中酶生物催化的研究,拓宽了生物酶的应用范围,为酶学研究注入了生机和活力.近几年来,众多的研究报道和综合评述展示了有机溶剂中的酶优于水酶的巨大应用潜力.在有机介质中使用固定化酶,可提高酶的扩散效果和热力学稳定性,调节和控制酶的活性和选择性,有利于酶的回收和连续化生产.用复合新型无机载体材料羟基磷灰固定化细胞,虽然经济可行,但是酶活及生物量都不是很理想,有待进一步研究.酶合成反应用酶活比较高的NOVOZYM435作为生物催化剂,探索酯合成的最优反应条件.采用无溶剂反应体系,酶法合成具有生物活性的支链醇酯,其最佳合成条件为:底物配比1.6:1,反应温 度为60℃,脂肪酶用量为4﹪,反应时间为10h.最高转化率为94.8﹪.

目录

文摘

英文文摘

前言

第一章文献综述

1.1脂肪酶与固定化脂肪酶

1.1.1脂肪酶的结构及研究进展

1.1.2固定化酶的性质及应用

1.1.3固定化细胞及其应用

1.1.4固态发酵的来源及发展

1.2功能无机材料的性能研究

1.2.1亲水性载体材料

1.2.2巯水性载体材料

1.2.3两亲性载体材料

1.3非水酶学及其研究进展

1.4支链醇及其衍生物

1.4.1支链醇及其衍生物的合成和性质

1.4.2支链醇及其衍生物在日用化工中的应用

第二章材料与方法

2.1实验材料

2.1.1菌种

2.1.2培养基

2.1.3固定化载体

2.1.4试剂

2.1.5仪器与设备

2.2实验方法

2.2.1菌种的活化

2.2.2菌体干粉的制备

2.2.3不同浓度孢子悬液的制备

2.2.4固态培养固定化细胞方法

2.2.5菌体生物量的测定

2.2.6固定化细胞的后处理方法

2.2.7固定化细胞胞内脂肪酶活力的测定

2.2.8多孔载体的制备方法

2.2.9固态培养基初始含水率测定方法(减重法)

2.2.10固态培养基初始PH影响实验方法

2.2.11酶的固定化

2.2.12支链醇酯的合成方法

第三章结果与讨论

3.1固定化菌种的选择

3.2载体的选择

3.3培养基对固定化细胞脂肪酶合成的影响

3.3.1碳源含量对固定化细胞胞内脂肪酶合成的影响

3.3.2氮源含量对固定化细胞胞内脂肪酶合成的影响

3.3.3金属离子对固定化细胞胞内酶合成的影响

3.3.4培养基初始PH值对固定化细胞的影响

3.3.5培养基初始含水量的影响

3.3.6接种量大小对固态培养固定化细胞的影响

3.4酶的固定化

3.4.1固定化方法对载体固定化脂肪酶酶活力的影响

3.4.2载体性质对固定化酶活性的影响

3.4.3固定化脂肪酶的酶活力

3.5固定化脂肪酶催化酯化反应

3.5.1有机溶剂的选择

3.5.2固定化脂肪酶的选择

3.5.3不同底物反应的选择性

3.5.4最佳合成条件的确定

3.5.5产物定性分析

第四章结论

参考文献

致 谢