辣椒抗黄瓜花叶病毒（CMV）遗传分析及ISSR分子标记筛选

摘要

黄瓜花叶病毒(CMV)是世界上流行最广和研究较多的植物病毒之一，每年在世界范围内对辣椒生产造成严重的危害和损失。目前关于辣椒抗CMV遗传和分子标记筛选的研究报道较少。本文以Vc16a、SS79与SS69构建F<,2>群体，通过对辣椒CMV遗传的研究，揭示其遗传规律，用ISSR方法筛选辣椒与抗CMV基因连锁的分子标记，为辣椒抗CMv育种提供遗传学与分子生物学的理论依据。 1．辣椒抗CMV遗传分析：采用植物数量性状单个世代群体遗传研究方法，对F2世代苗期和成株期发病情况进行分析，研究辣椒抗CMV遗传规律。辣椒苗期和成株期对CMV抗性遗传符合由两对主基因控制的模型，但主基因间表现的作用有所不同。在苗期，05CM-8、05CM-9以及05CM-11的遗传模型都是B-1模型，即主基因间表现为加性-显性-上位性作用；05CM-10符合B-2模型，即主基因间表现为加性．显性作用。05CM-8、05CM-10抗CMV主基因遗传率均为100％；05CM-9和05CM-11抗CMV主基因遗传率也较高，分别为93.97％、99.33％。在成株期也符合由两对主基因控制的模型，但与苗期略有差别：05CM-8与05CM-10的遗传模型都是B-2模型，05CM-9与05CM-11遗传模型都是B-1模型。成株期05CM-8抗CMV主基因遗传率为100％，05CM-10抗CMV主基因遗传率为95.04％，05CM-9和05CM-11抗cMV主基因遗传率分别为62.91％和61.32％。 2．辣椒ISSR-PCR体系优化：采用4因素3水平[L<,9>(3)<'4>]正交实验设计，由：Mg<'2+>、Taq酶、引物和dNTPs组成，对ISSR-PCR体系进行优化，获得最优体系：20μL体系中Mg<'2+>为1.5mmol/L、Taq酶1.5U、引物0.6μmol/L、dNTPs200μmol/L， 1×Buffer，50ng模板DNA。 3．辣椒与抗CMV连锁的ISSR分子标记筛选：应用BSA-ISSR技术建立F<,2>代抗感池并筛选抗CMV标记。用40个ISSR引物对Vc16a和SS69及其F<,2>抗感池进行扩增，其中I-3、I-10、I-13和I-34这4个引物在抗感池中扩增出具有多态性条带。这4个引物经F2代单株验证和连锁分析，表明引物I-13和I-34筛选出的标记存在连锁关系，遗传距离为16.3cM，该特异性片段约为1100bp，命名为I-13<,1100>；I-34与辣椒抗CMV抗病位点连锁，遗传距离为27.3cM，该特异性片段约为450bp，命名为I-3<,4450>。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:符号及缩略词表

引言

第一部分文献综述

第二部分研究报告

第一章辣椒抗CMV遗传规律研究

第一节辣椒苗期抗CMV遗传规律研究

第二节辣椒成株期抗CMV遗传规律研究

第二章辣椒抗CMV的ISSR分子标记筛选

第一节辣椒ISSR-PCR反应体系优化

第二节辣椒抗CMV的ISSR分子标记筛选

全文结论

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间发表的学术论文