体外模拟热C02气腹对胃癌细胞作用的实验研究

摘要

目的: 通过体外模拟热CO2气腹模型，研究热CO2气腹(42℃、43℃)对胃癌细胞SGC-7901及MFC的杀伤、增殖抑制以及抑制侵袭和迁移作用，从而进一步探讨其作为一种新的抑制腹腔种植转移方法应用于腹腔镜胃癌手术中的可行性。
　　方法:建立体外热CO2气腹实验模型，通过热CO2气腹对胃癌细胞(SGC-7901、MFC)的作用，系统深入地探讨不同作用温度和作用时间(42℃、43℃，1-3小时)的热CO2气腹的杀伤、增殖抑制以及抑制侵袭和迁移作用，并明确其作用机制。MTT法检测细胞杀伤及增殖抑制作用;流式细胞术测细胞凋亡和透射电镜观察细胞形态以明确细胞死亡机制;Transwell法及划痕实验观察细胞侵袭与迁移能力。
　　结果: MTT法检测表明热CO2气腹能显著抑制胃癌SGC-7901、MFC细胞增殖，42℃作用3h时增殖抑制率即有（23.42±3.57）％(P＜0.05），43℃作用3h后，细胞增殖抑制率高达（30.15±4.22）％;流式细胞术测细胞凋亡和透射电镜观察细胞形态分析表明，细胞凋亡是热CO2气腹作用后细胞死亡的主要方式。热CO2气腹诱导细胞凋亡呈剂量依赖性，凋亡比例随作用温度和时间的增加而不断增加，43℃作用3h后的凋亡检测表明细胞凋亡率达29.88±1.35％(P＜0.05);形态学观察（透射电镜）显示典型的细胞凋亡改变。Transwell实验及划痕实验观察细胞侵袭与迁移能力结果表明，与对照组相比，热CO2气腹对胃癌细胞的侵袭和迁移有明显的抑制作用，并呈明显的时间依赖性。在接受热CO2气腹(42℃、43℃)处理后，侵袭和迁移过Matrigel-包被的PVDF膜的胃癌细胞数目明显少于对照组，差异具有统计学意义。
　　结论: 热CO2气腹对胃癌细胞有显著的杀伤作用、抑制增殖、抑制侵袭和迁移作用。本研究表明热CO2气腹具有应用于胃癌腹腔种植转移处理的潜质，有必要通过体内动物实验进一步探讨热CO2气腹对胃癌腹腔种植转移的影响及其机制，从而有望为临床上腹腔镜胃癌手术中胃癌细胞腹腔种植转移的防治提供一种新的思路和方法。