脱细胞+戊二醛+肝素处理猪主动脉瓣降低免疫原性

摘要

目的:人工心脏生物瓣膜具有无声响、无溶血、血栓发生率低、血流动力学良好，不需终身抗凝等优点，但也存在耐久性差、易衰坏等缺陷。生物瓣膜在人体内衰坏的主要原因是瓣膜钙化，而瓣膜本身的免疫原性是引起钙化衰坏的重要因素。因此，生物瓣膜的免疫原性越来越受到人们关注。本试验在前期研究基础上使用脱细胞+戊二醛(Glutaraldehyde，GA)+肝素结合处理猪主动脉瓣，并对其免疫原性进行评价，探索预防人工心脏生物瓣膜钙化的新途径。 方法:将新鲜猪主动脉瓣分为A、B、C、D四组。A组:新鲜猪主动脉瓣;B组:应用去污剂-酶消化法(detergent extraction and enzymatic，DEE)对新鲜猪主动脉瓣进行脱细胞处理;C组:应用脱细胞+GA处理新鲜猪主动脉瓣;D组:应用脱细胞+GA+肝素结合处理新鲜猪主动脉瓣。以各组瓣膜制作浸提液作为抗原刺激剂，刺激小鼠脾淋巴细胞产生含有趋化因子的细胞上清，通过Transwell迁移试验观察并计算各组瓣膜对应的细胞上清淋巴细胞迁移率，用SPSS17.0对结果进行统计学分析。 结果:各组瓣膜对应的淋巴细胞迁移率分别为:A组:45.2804±3.5841％;B组:18.4329±1.3699％;C组:11.8626±1.0043％;D组:8.7693±0.7162％。用SPSS17.0对各组细胞迁移率进行单因素方差分析，方差齐性检验:F=2.643，P=0.075，方差不齐;各组间P值分别为:A与B: P=0.002，A与C: P=0.002，A与D: P=0.002，B与C: P=0.004，B与D: P=0.001，C与D: P=0.032，各组间差异均有统计学意义。 结论:脱细胞+GA+肝素结合处理的新鲜猪心脏瓣膜与其他三组瓣膜相比，免疫原性明显降低。

目录

摘要

前言

材料与方法

1 试验器材

2 试验试剂

3 试验材料及动物

4 试验方法

5 统计学处理

结果

1 各组瓣膜HE染色观察

2 BALB／c小鼠脾脏淋巴细胞的获得

3 小鼠脾淋巴细胞台盼蓝染色

4 淋巴细胞迁移实验

讨论

1 人工心脏生物瓣膜相关免疫原性

2 人工心脏生物瓣膜免疫原性导致钙化的证据

3 降低人工心脏生物瓣膜免疫原性方法

4 细胞迁移实验与免疫检测

结论

参考文献

文献综述 心脏生物瓣膜材料相关免疫反应及其预防进展

致谢

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