头孢洛宁乳房注入剂防治干乳期奶牛乳腺炎的药效学及残留消除研究

摘要

奶牛乳腺炎是养殖业中常见的一种疾病。头孢洛宁(Cephalonium，CEPL)是第一代半合成的头孢菌素类抗生素，其抗菌谱广，对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌具有较强的抗菌活性，在兽医临床上主要用来预防和治疗敏感菌引起的干奶期奶牛乳腺炎。本试验通过对头孢洛宁防治干乳期奶牛乳腺炎的有效性及其在产犊后泌乳奶牛牛奶中残留消除规律等研究，为头孢洛宁临床合理用药提供参考。 1、头孢洛宁对乳腺炎临床分离菌的体外抗菌活性本研究采用微量稀释法测定头孢洛宁、头孢匹林、阿莫西林和氯唑西林对乳腺炎病原菌的的体外抗菌活性。结果显示，头孢洛宁、头孢匹林、阿莫西林、氯唑西林对分离自奶牛乳腺炎的大肠杆菌MIC50分别为4、8、8、＞128μg/ml，MIC90分别为64、64、＞128、＞128μg/ml;对金黄色葡萄球菌的MIC50分别为0.125、0.25、2、1μg/ml，MIC90分别为16、16、32、128μg/ml。对乳房链球菌的MIC50分别为4、8、16、128μg/ml，MIC90分别为8、16、64、＞128μg/ml;对停乳链球菌的MIC50分别为8、8、8、128μg/ml，MIC90分别为16、8、128、＞128μg/ml;对无乳链球菌MIC50分别为0.25、4、0.25、32μg/ml，MIC90分别为4、16、4、＞128μg/ml。药敏试验结果表明，头孢洛宁对引起奶牛乳腺炎的主要病原菌均具有良好的抗菌活性。 2、头孢洛宁干乳期乳房注入剂防治干乳期乳腺炎的药效学研究本研究随机选择60头进入干乳期的临床健康奶牛，在最后一次挤奶后每头牛的每个乳区分别灌注一管受试药或对照药物。对入选的每头奶牛分别在干奶前、以及产后1、3、5天，采集每个乳区的乳样进行体细胞计数和细菌学检查。在药物处理后至产后14天内，每天对受试动物进行临床型乳腺炎检查。结果显示，头孢洛宁干乳期乳房注入剂对干乳期奶牛乳腺炎具有良好的防治效果，在治愈率、新感染率及细菌学清除率方面和对照药物相比均无显著性差异。表明进入干乳期奶牛每乳区灌注一管250 mg的头孢洛宁干乳期乳房注入剂能有效治疗干乳期隐性乳腺炎和预防新的乳腺炎感染。 3、头孢洛宁在牛奶中残留量的高效液相色谱质谱测定方法试料中残留的头孢洛宁和头孢匹林及其代谢物去乙酰化头孢匹林用含乙腈提取和净化。用液相色谱-串联质谱法测定，内标法定量。牛奶中3种药物的标准曲线在2.5μg/kg～100μg/kg线性关系良好，检测限为2.5μg/kg，定量限为5μg/kg。回收率均在75％以上。日内变异系数在1.67％～9.68％之间，日间变异系数在2.21％～6.62％之间。本研究建立了同时检测牛奶中头孢洛宁和苄星头孢匹林的高效液相色谱串联质谱的方法，适用于牛奶中头孢洛宁和头孢匹林残留量的检测。 4、头孢洛宁干乳期乳房注入剂弃奶期研究40头进入干乳期的健康奶牛，干奶前挤干每个乳区内乳汁后，每个乳区分别注入一支250 mg的头孢洛宁乳房注入剂。给药后奶牛不再挤奶直至产后下一泌乳期开始，产犊后连续采集每头泌乳牛前10次所挤的奶样，将每头奶牛每次采集的4个乳区混合奶样中取100 ml供残留检测。 牛奶中头孢洛宁残留采用上述建立的HPLC/MS检测方法测定。残留检测结果表明，使用头孢洛宁干乳期乳房注入剂的奶牛产犊后前10次挤奶样品中头孢洛宁的残留量均低于检测限，根据欧盟规定的最高残留限量10μg/kg，当干乳期时间长于40 d或以上时，建议弃奶期可定为0d。

目录

摘要

符号说明

第一章 文献综述

1 奶牛乳腺炎的危害

2 奶牛乳腺炎的病因

2．1 病原微生物的感染

2．2 遗传因素

2．3 饲养管理

2．4 环境因素

2．5 其他因素

3 奶牛乳腺炎的分类

3．1 亚临床型乳腺炎

3．2 临床型乳腺炎

4 奶牛乳腺炎的诊断

4．1 乳汁体细胞计数(SCC)

4．2 化学检验

4．3 电导率值检验法

5 奶牛乳腺炎的预防

6 奶牛乳腺炎的抗生素治疗

7 头孢洛宁研究目的和意义

参考文献

第二章 头孢洛宁对引起乳腺炎主要致病菌的体外敏感性试验

1 材料

1．1 试验菌株

1．2 受试药

1．3 试剂

1．4 仪器

2 方法

2．1 药物储备液的配置及保存

2．2 菌液的制备

2．3 最小抑菌浓度(MIC)的测定

3 结果

3．1 受试药对乳腺炎大肠杆菌的MIC测定结果

3．2 受试药对引起奶牛乳腺炎的链球菌体外敏感性测定结果

3．3 受试药乳腺炎金葡菌药敏试验结果

4 讨论

5 结论

参考文献

第三章 头孢洛宁干乳期乳房注入剂防治干乳期乳腺炎的有效性

1 材料

1．1 试剂

1．2 药品

1．3 仪器

1．4 试验动物

2 方法

2．1 动物的入选和剔除标准

2．2 试验动物饲养管理

2．3 试验动物分组

2．4 给药方案

2．5 样品的采集与处理

2．6 有效性评价参数

2．7 数据处理

3 结果

3．1 治愈情况

3．2 新近感染发生情况

3．3 产后体细胞数

4 讨论

参考文献

第四章 头孢洛宁干乳期乳房注入剂在牛奶中残留消除研究

一、牛奶中头孢洛宁残留的HPLC-MS／MS测定

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

二、头孢洛宁干乳期乳房注入剂在牛奶中残留消除研究

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

5 小结

参考文献

结论

附录

致谢

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