扬州地区部分屠宰场、农贸市场和动物医院猪源沙门菌分离鉴定、耐药性分析及致病性研究

摘要

沙门菌是一类极其重要的食源性病原菌，在严重威胁着畜禽产品的安全的同时，也给人类的健康造成了严重的威胁。蛋类、畜禽类动物产品现在已成为沙门菌的重要污染源，而猪肉是中国重要的肉类消费品，在中国人日常饮食的动物蛋白来源中占到近70％的比例，因而有效的控制和减少猪肉在屠宰、加工、运输及销售过程中细菌的污染对提升肉制品的卫生情况和减少食品卫生安全问题的发生有着重要的意义。
　　本研究旨在调查扬州地区部分屠宰场的屠宰流程及农贸市场中猪肉沙门菌的污染情况及沙门菌分离株的耐药情况，同时根据动物医院送检病料中沙门菌的分离情况判断扬州周边地区猪源沙门菌的血清型及流行情况，为流行病学调查提供数据资料，也为周边猪场沙门菌病的防治提供资料。
　　1、扬州地区部分屠宰场、农贸市场及动物医院样品中沙门菌的分离鉴定及耐药性分析
　　2015年至2016年间，共从扬州某屠宰场采集样品1358份、扬州农贸市场采集样品182份和扬州大学动物医院采集样品187份，按照GB4789.4-2010中分离程序对采集样品进行沙门菌分离，并结合PCR方法进行沙门菌鉴定。屠宰场样品中沙门菌的分离率为10.5％，农贸市场样品中沙门菌分离率19.7％，动物医院样品中沙门菌的分离率为2.6％。结果分析说明季节对屠宰场和农贸市场中沙门菌的分离率无明显影响。对不同来源的沙门菌分离株进行血清型鉴定，屠宰场分离株中德尔卑沙门菌分离率最高(63.6％)。鼠伤寒沙门菌、罗森沙门菌也是常见的血清型;农贸市场分离株中罗森沙门菌和德尔卑沙门菌分离率最高(27.8％)，鸭沙门菌次之;而动物医院送检病料中的检出的全部为鼠伤寒沙门菌(100％)。对所有分离株进行药物敏感性测定，结果表明84.8％沙门菌分离株对四环素表现出极高的耐药率，对强力霉素、羧苄西林也有较高的耐药率。屠宰场分离株中57.4％菌株耐9种以上抗生素，农贸市场中44.4％菌株对9种以上抗生素产生抗药性，而动物医院分离株9种以上抗生素耐药率则高达100.0％。
　　2、屠宰场、农贸市场及动物医院来源的沙门菌分离株的毒力基因测定、PFGE分型分析及小鼠致病性研究
　　为研究沙门菌分离株中毒力基因的分布，运用PCR方法对全部分离株进行mogA，sscA，sseC, mgtC, siiE, sopB毒力基因的检测，各毒力基因检出率分别为81.5％(150/184)、70.1％(129/184)、68.5％(126/184)、87.5％(161/171)、85.7％(158/184)、70.7％(130/184)。共有57株沙门菌含有全部6种毒力基因，占全部分离株31％，其中屠宰场来源的沙门菌有47株，占82.5％，农贸市场来源的沙门菌有5株，占8.75％，动物医院来源的沙门菌有5株，占8.75％。通过脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis，PFGE)分型将27株德尔卑沙门菌、9株罗森沙门菌及17株鼠伤寒沙门菌分成18、8和17个PFGE谱型(PFGEpatterns，PF)。从农贸市场中可以找到与屠宰场来源沙门菌相同的PFEG谱型。表明沙门菌可在屠宰场和农贸市场之间传播。
　　选取5个分离株和1株猪霍乱沙门菌参考株(CVCC503)以109CFU的剂量腹腔注射攻毒6-8周龄KM系小鼠，死亡高峰发生于攻毒后8-12 h，且攻毒后的24 h内，各攻毒组小鼠全部死亡。剖解死亡小鼠可以观察到小鼠组织脏器呈现急性败血症病变，且病死小鼠有严重的腹腔积液。LD50结果表明，6个攻毒组中JY-1攻毒组的LD50值为1.48×105，小鼠的死亡率为52.8％，6个菌株中JY-1菌株对小鼠的致病性最强，而T4-D1菌株和参考株CVCC503的致病性相近。

目录

摘要

符号说明

沙门菌文献综述

1 屠宰场中食源性沙门菌的污染现况

2 农贸市场猪肉沙门菌的污染状况

3 沙门菌的感染机制及致病性

4 沙门菌毒力相关因子的研究

5 沙门菌耐药现状

6 沙门菌的分型技术

参考文献

第一章 扬州地区部分屠宰场、农贸市场以及猪源沙门菌分离株的分离鉴定及药物敏感性分析

1 材料

2 方法

3 实验结果

4 讨论

参考文献

第二章 扬州地区部分屠宰场、农贸市场以及猪源沙门菌分离株的脉冲场分型及相关生物学特性研究

1 材料

2 方法

3 实验结果

4 讨论

参考文献

全文小结

附录

致谢

声明