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【6h】

鸡外周血淋巴细胞免疫应答REV感染的分子遗传机制研究

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论文说明

摘要

缩略词表

第一章文献综述

1.REV对家禽的危害及致病机理

1.1 REV对家禽业的危害

1.2 REV感染家禽致病机理的研究进展

2.家禽的免疫系统

2.1家禽免疫系统的组成

2.2免疫系统的分类

3.REV感染家禽后免疫应答调控

3.1免疫因子和相关基因对REV感染家禽的应答

3.2免疫相关信号通路对REV感染的免疫反应

4.LncRNA在免疫应答调控中的研究进展

4.1 LncRNA的基本介绍与作用机制

4.2 LncRNA在免疫调节以及自身免疫性疾病中的作用

5.本研究的目的与意义

6.研究内容与技术路线

6.1研究内容

6.2技术路线图

第二章鸡REV感染模型的建立

1.试验材料

1.1实验动物

1.2主要仪器与试剂

2.试验方法

2.1鸡REV感染模型的建立

2.4鸡血液淋巴细胞的REV体外感染模型的建立

2.5 DNA提取

2.6 REV检测

2.7淋巴细胞数目检测

2.8细胞流式术(FcM)检测细胞周期

2.9免疫因子检测

2.10数据分析及处理

3.结果

3.1鸡体内、外REV感染模型的建立

3.2 REV感染对免疫器官指数和血液淋巴细胞数量的影响

3.3体内、外REV感染对免疫因子分泌的影响

4.讨论

第三章REV感染鸡外周血淋巴细胞的免疫调控机理

1.试验材料

1.1实验细胞

1.2主要仪器与试剂

2.试验方法

2.1样品的准备

2.2总RNA的提取及反转录

2.3转录组测序

2.4转录组数据分析

2.5荧光定量PCR验证

2.6 GO富集分析

2.7 KEGG通路分析

2.8数据分析及处理

3.结果

3.1 RNA质检

3.2差异表达基因筛选与相关功能基因分析

3.3免疫应答相关劝能基因

3.4细胞周期相关功能基因

3.5脂肪代谢相关功能基因

4.讨论

第四章MAPK-AP1通路介导鸡免疫应答REV感染的作用

1.试验材料

1.1实验动物

1.2主要仪器与试剂

2.1细胞培养与处理

2.2 Western blotting

2.3 MTT检测

2.4免疫因子检测

2.5数据分析及处理

3.结果

3.1体内、外REV感染模型中MAPK-AP1信号通路中关键因子的活性

3.2体外单独抑制JNK或p38MAPK对外周血淋巴细胞的影响

3.3体外激活JNK、p38MAPK对淋巴细胞的影响

3.4 JNK和p38MAPK通路被联合处理后淋巴细胞的变化

3.5 AP1被抑制后淋巴细胞的变化

4.讨论

第五章LncRNA对淋巴细胞应答REV感染的关键基因表达调控

1.试验材料

2.4 LncRNA的鉴定与分析

2.5目标基因预测与KEGG分析

2.6测序结果的验证

2.7 Lnc11530和Lnc09863的siRNA与淋巴细胞感染

2.8数据分析及处理

3.结果

3.1差异表达的LncRNA

3.2基于差异表达的蛋白编码基因筛选LncRNA的靶基因及其参与通路

3.3两个候选LncRNA的结构分

3.4两个候选LncRNA及其靶基因在体内、外模型淋巴细胞的表达

3.5 LncRNA干扰后对淋巴细胞的免疫影响

4.讨论

全文结论

创新点

进一步工作设想

参考文献

附录

致谢

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