吡格列酮（Pioglitazone）对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及其PPARγ依赖性抑制NF-κB信号转导通路的机制

摘要

目的：观察吡格列酮(Pioglitazone，Piog)对大鼠永久性局灶性脑缺血的保护作用及其过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(peroxisome proliferation-activated receptor,PPARγ)依赖性抑制NF-кB信号转导通路的作用。 方法：采用大鼠永久性大脑中动脉阻塞(permanent middle cerebral artery occlusion，pMCAO)模型观察Piog 0.5、1、2mg/kg对脑梗塞体积、脑水肿、行为学症状的影响。大鼠脑缺血前24小时、脑缺血时两次腹腔注射Piog，或者，大鼠脑缺血后10分钟一次腹腔注射Piog。大鼠脑缺血前30 min侧脑室注射PPARγ的特异性的抑制剂GW9662150、300、600nmol/kg，大鼠脑缺血后10分钟一次腹腔注射Piog 1mg/kg，采用pMCAO模型观察GW9662对脑梗塞体积及NF-кB信号通路的.影响。采用Western-blot法检测纹状体boBα、p-ERK的蛋白水平；应用免疫组织化学法分析纹状体NF-кB的核转位；采用RT-PCR法检测纹状体NF-кB靶基因p53 mRNA的表达。 结果：Piog 0.5、1、2mg/kg腹腔注射呈剂量依赖性改善行为学症状，减少pMCAO大鼠脑梗死体积，降低脑含水量(P<0.05，P<0.01)。GW9662 300、600nmol/kg能拮抗Piog对脑缺血的保护作用。Western-blot显示：大鼠pMCAO后6小时纹状体IкBα的蛋白含量显著减少(P<0.01)，Piog 0.5、1、2mg/kg能显著增加纹状体IKBα的蛋白含量(P<0.01)，GW9662 300、600nmol/kg能显著降低纹状体IкBα的蛋白含量(P<0.01)；大鼠pMCAO后12小时纹状体p-ERK的蛋白含量显著减少(P<0.01)，Piog0.5、1、2mg/kg能显著增加纹状体p-ERK蛋白含量(P<0.01)，GW9662 300、600nmol/kg能显著降低纹状体的p-ERK蛋白含量(P<0.01)；免疫组化证明：假手术组大鼠大脑纹状体NF-кB主要表达在神经细胞胞浆中，pMCAO后12小时，模型组大鼠大脑纹状体NF-кB主要表达于神经细胞胞核，说明缺血使NF-кB从细胞浆移位至细胞核；Piog 0.5、1、2mg/kg能抑制NF-кB的核转位(P<0.01)；GW9662 300、600nmol/kg能拮抗Piog对NF-кB的核转位的抑制(P<0.05)。RT-PCR结果表明：大鼠pMCAO后12小时纹状体p53 mRNA的表达显著增加，piog 1、2mg/kg能显著下调纹状体的p53 mRNA的表达，GW9662 300、600nmol/kg能显著上调降低纹状体p53 mRNA的表达。 结论：Piog对大鼠脑缺血具有保护作用，其作用机制可能与其PPARγ依赖性抑制NF-кB信号转导通路有关。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

第一部分吡格列酮对大鼠永久性局灶性脑缺血的保护作用

材料与方法

结 果

小 结

第二部分Piog保护脑缺血作用的分子机制

第一节Piog对大鼠永久性局灶性脑缺血的保护作用与NF-κB信号通路的关系

一、pMCAO大鼠大脑纹状体IκBα，p-ERK蛋白水平及p53 mRNA的时程变化

二、Piog对pMCAO大鼠缺血纹状体IκBα、p-ERK蛋白水平，NF-κB核转位及p53 mRNA表达的影响

小结

第二节Piog对大鼠永久性局灶性脑缺血的保护作用与PPARγ的关系

一、侧脑室注射GW9662对Piog的减少脑梗死面积的影响

二、GW9662对pMCAO大鼠大脑纹状体IκBα、p-ERK蛋白水平，NF-κB核转位及p53 mRNA表达的影响

小 结

讨论

结论

参考文献

综述 基质金属蛋白酶与神经疾病

附录

致谢