兔HPRT基因和POU5F1基因的克隆及其打靶载体的构建

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由于兔在生理，解剖方面比小鼠更加接近人类，所以兔作为疾病模型诸如肥厚性心肌病，脂蛋白代谢紊乱，动脉粥样硬化等方面有着小鼠无法比拟的优势。除心血管疾病外，兔子在肺部疾病，眼科疾病，药物毒性试验代谢疾病，获得性免疫缺陷综合征(AIDS)，以及癌症等方面有着广泛应用。利用转基因动物在其乳腺组织中表达人源性基因来生产重组治疗性蛋白是一种非常经济、高效的方式。转基因兔在其哺乳期能生产出几十至几百克的药用蛋白，并且己经证实其能有效地表达具有复杂结构的蛋白质，所以兔还是一种非常优良的乳腺反应器。近来，本实验室成功建立了体细胞克隆兔的技术，这使得通过同源重组结合核供体细胞筛选来生产定点修饰的转基因兔成为可能。目前，我们正在建立“基因改造-克隆兔”的技术平台。本论文主要任务是为建立“基因改造-克隆兔”的技术平台做一些基础性工作。整个实验主要分两部分。第一部分，我们利用重组系统克隆了兔．HPRT基因，并成功构建了HPRT基因最后三个外显子缺失的敲除打靶载体和3'非翻译区靶向插入IRES-EGFP-IRES-Neo-bGHpA盒的无启动子的敲入打靶载体。第二部分，我们克隆了兔POU5F1基因，并成功构建了POU5FJ基因3'非翻译区靶向插入IRES-EGFP-IRES-Neo-bGHpA盒的无启动子打靶载体。

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作者
蔡东晖;
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作者单位

苏州大学;

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授予单位苏州大学;
学科细胞生物学
授予学位硕士
导师姓名叶荣;
年度 2007
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类基因的重组;
关键词
基因改造; 同源重组; 打靶载体; HPRT基因; POU5F1基因;

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